Liver Assembloids to Clarify and Treat Cellular and Molecular Drivers of Steatohepatitis (DECODE)

Il progetto DECODE mira a sviluppare modelli tridimensionali di fegato umano (Human Liver Assembloids, HLA) per studiare i meccanismi cellulari e molecolari alla base della MASLD e della sua progressione a steatoepatite (MASH). La ricerca prevede la generazione di HLA combinando organoidi epatici derivati da pazienti con cellule non parenchimali del fegato (HSC, LSEC, macrofagi/KC) e la loro caratterizzazione strutturale e funzionale mediante immunofluorescenza, microscopia elettronica, misurazione della secrezione di albumina e ApoB e valutazione dell’attività dei citocromi. Gli HLA saranno esposti a stimoli ambientali quali acidi grassi, colesterolo, fruttosio, insulina e LPS per modellare MASLD/MASH e saranno analizzati con approcci lipidomici, metabolici e multi-omici, inclusi scRNA-seq e scATAC-seq. Il progetto indagherà inoltre l’impatto della variante genetica PNPLA3 p.I148M su epatociti e cellule non parenchimali, integrando dati metabolici, lipidomici ed epigenetici e utilizzando approcci di silenziamento RNAi per definire i meccanismi di gain- o loss-of-function. Infine, verrà sviluppato ExoLiver, un vettore basato su vescicole extracellulari per modulare selettivamente l’espressione di PNPLA3, testato sugli HLA per correggere i fenotipi MASLD e valutare il potenziale di strategie terapeutiche di precisione.