Identificazione di marcatori biomolecolari prognostici nella progressione cirrosi-displasia-epatocarcinoma.

Nonostante il carcinoma epatocellulare (HCC) sia il tumore maligno più comune nel fegato e la terza causa di morte per cancro nel mondo, la caratterizzazione molecolare della sequenza cirrosi-displasia-epatocarcinoma è, ad oggi, poco nota. L’infezioni croniche da virus dell’epatite B e C rappresentano il fattore di rischio predominante congiuntamente a processi necroinfiammatori ed alla conseguente fibrosi. L’approccio curativo principale è la rimozione chirurgia della neoplasia, attuabile in una minoranza di casi. La frequenza di recidive è molto elevata e la risposta dell’HCC alle chemioterapie convenzionali è marginale. L’identificazione di marcatori molecolari in grado di predire la progressione della malattia e la responsività dei pazienti a chemoterapia è quindi di estremo interesse. Recenti studi hanno evidenziato il ruolo dei microRNA (miRNA) nella patogenesi, progressione e prognosi di molte neoplasie, tra cui l’HCC. Ci proponiamo di identificare i miRNA predittori di progressione neoplastica e di risposta a trattamento farmacologico avvalendoci di una casistica rappresentativa della sequenza cirrosi-displasia-carcinoma. Popolazione purificate di tessuto epatico normale, noduli rigenerativi cirrotici, noduli displastici di basso ed alto grado, e carcinomi epatocellulari a vari stadi verranno ottenuti tramite microdissezione laser. l’RNA totale verrà estratto tramite kit idonei al materiale d’archivio. I profili di espressione di 670 microRNA, ottenuti tramite piattaforma low-density-array, verranno correlati ai vari stadi analizzati. Verranno inoltre indagati i miRNA il cui profilo di espressione risulterà modificato dal trattamento farmacologico. In una seconda fase identificheremo i potenziali target genici dei miRNA precedentemente selezionati avvalendoci di colture di cellule di HCC (studi in vitro) e di studi di espressione proteica. Tali indagini immunoistochimiche saranno eseguite su tissue-microarrays contenenti i campioni analizzati (test set) ed una casistica indipendente di noduli con caratteristiche clinico-patologiche similari (validation set) Lo scopo finale di questo progetto è di identificare biomarcatori utili nella diagnosi clinica di lesioni rigenerative/displastiche/maligne su biopsia epatica, nonchè di disporre di marcatori molecolari in grado di predire la comparsa di epatocarcinoma e la risposta a terapia. L’identificazione di miRNA con significato prognostico e predittivo di malattia, potrebbe contribuire ad una diagnosi precoce di epatocarcinoma ed a selezionare la popolazione meritevole di stretto follow-up clinico.