Valutazione dell'espressione di diverse citochine in biopsie duodenali di cani con Inflammatory Bowel Diseases (IBD)
Progetto Le Inflammatory Bowel Diseases (IBD) sono un gruppo di patologie caratterizzate da segni gastrointestinali cronici, aspecifici e associati all'evidenza istologica di infiltrazione infiammatoria a carico della lamina propria dell'intestino tenue e/o di quello crasso, descritte con frequenza crescente sia in campo umano (morbo di Crohn, colite ulcerosa), sia in campo veterinario (enterite/colite linfoplasmacellulare, enterite eosinofilica, colite ulcerativa istiocitaria del cane Boxer, granuloma eosinofilico, enterocolite granulomatosa, sindrome diarroica del Basenji).
Sebbene l'eziopatogenesi delle IBD non sia stata ancora adeguatamente chiarita, non vi è dubbio che la fisiopatologia di queste malattie abbia una componente immunomediata. Il meccanismo patogenetico che porta all'espressione di una forma infiammatoria piuttosto che di un'altra non è stato ancora sufficientemente definito. Le teorie sulla patogenesi delle forme idiopatiche umane sono molteplici e includono una risposta immunitaria anomala a un antigene luminale o mucosale, una risposta anomala a un batterio commensale o un'infezione da microrganismi patogeni che generano una flogosi cronica restando nei tessuti o inducendo un'alterazione nella risposta immunitaria che permane anche dopo la risoluzione dell'infezione.
In un precedente studio (realizzato con fondi FIRST), mediante citometria a flusso sono state valutate le sottopopolazioni linfocitarie presenti in biopsie endoscopiche duodenali prelevate da cani sani e da cani con IBD, da un lato per approfondire le conoscenze sulle popolazioni linfocitarie normali presenti nella mucosa intestinale del cane e dall'altro per identificare le diverse sottopopolazioni linfocitarie coinvolte nell'IBD. I risultati di questo complesso studio sono ancora in fase di attenta valutazione e una loro corretta interpretazione sarà possibile solo quando saranno a disposizione i risultati delle analisi istologiche condotte contemporaneamente sugli stessi campioni bioptici.
Con questo progetto si intende continuare lo studio sull'immunopatogenesi dell'IBD canina, valutando l'espressione di diverse citochine [TNF-alfa (proinfiammatoria) - IL-6 (Th1) - IFN-gamma (Th2)] in biopsie endoscopiche duodenali degli stessi soggetti analizzati nel primo studio (cani sani e cani con IBD), per meglio capire il coinvolgimento del sistema immunitario quale noxa di questa peculiare patologia per molti versi ancora enigmatica e, in particolare, per confermare eventualmente il ruolo dei linfociti T helper nella patogenesi dell'IBD come evidenziato da una prima analisi delle sottopopolazioni linfocitarie presenti. L'espressione di citochine verrà valutata mediante RT Real Time PCR previa estrazione dell'RNA totale e sua retrotrascrizione in cDNA per la quantificazione degli mRNA specifici. L'analisi dell'espressione verrà condotta con ABI Prism 7000 in combinazione con la chimica TaqMan, con sonde disegnate sulla sequenza delle citochine di cane presenti in GeneBank.