STUDIO DELLA SUSCETTIBILITA' ALLO SVILUPPO DI TUMORI ASSOCIATI A COLITE CRONICA IN TOPI KNOCK OUT PER TIR8
Progetto TIR8/SIGIRR è un recettore orfano della superfamiglia di recettori Toll/IL-1 (TIR). Questo recettore è caratterizzato dalla presenza di un singolo dominio Ig-like extracellulare, dal caratteristico dominio TIR, comune a tutti i membri della superfamiglia, e da una lunga coda di 95 aminoacidi intracitoplasmatica che ha proprietà inibitorie. TIR8 è espresso in diversi tessuti, ma specialmente nell¿apparato gastroenterico con un livello di espressione molto alto nelle cellule epiteliali. Recenti studi hanno evidenziato la capacità di TIR8 di inibire il signaling dei recettori IL-1R/TLR. L¿ipotesi è che TIR8 funga da recettore decoy imprigionando IRAK-1 e TRAF-6, due mediatori della cascata del segnale. La risposta proinfiammatoria potrebbe diventare dannosa se non fosse finemente regolata a differenti livelli, intra ed extra cellulari. Molti ricercatori hanno evidenziato, sulla base di studi epidemiologici e di modelli animali, che l¿infiammazione cronica localizzata ha un ruolo importante nello sviluppo di neoplasie. Inoltre l¿ambiente che circonda le neoplasie è caratterizzato dalla presenza di mediatori e da cellule che promuovono il progredire delle cellule tumorali. Le cellule neoplastiche producono sostanze che richiamano leucociti, che a loro volta promuovono la proliferazione e la progressione del tumore. Il fattore di retrotrascrizione NFkB si attiva nelle cellule infiammatorie in risposta a stimoli microbici, citochine infiammatorie e molecole rilasciate da cellule necrotiche; una volta attivato regola la produzione di citochine, chemochine e fattori di crescita e angiogenetici. Nelle cellule neoplastiche favorisce la trascrizione di geni che regolano il ciclo cellulare, di geni anti apoptotici e di proteasi invasive. Premesso questo ruolo di NFkB ne deriva che la regolazione della sua attivazione e traslocazione nel nucleo devono essere finemente regolate. Con un modello animale di colite cronica e carcinogenesi vorremmo studiare il ruolo di TIR8 nella regolazione di NFkB. Topi knock out per TIR8 e topi wild-type saranno trattati con Azoxymethane e cicli ripetuti di Sodio Destran Solfato al fine di indurre l¿insorgenza di neoplasie nel colon e nel retto. Andremo poi a valutare la perdita di peso, il sanguinamento nelle feci, la mortalità e la produzione di citochine e chemochine nel siero dei due gruppi sperimentali. Inoltre valutazioni istologiche consentiranno di determinare l¿entità della presenza di neoplasie e dell¿infiammazione. Con tecniche di immunoistochimica si cercherà di localizzare le diverse componenti cellulari di tipo infiammatorio e di valutare la proliferazione e l¿apoptosi nei due gruppi sperimentali. Questo modello servirà a meglio comprendere il ruolo di TIR8 nella modulazione del fattore di trascrizione NFkB e più in generale nell¿insorgenza delle neoplasie a seguito di infiammazioni croniche localizzate e magari sarà possibile individuare nuovi target farmacologici nella lotta all¿insorgenza dei tumori.