DMT1 (divalent cation transporter) nell'assorbimento di metalli. Ruolo dei residui di cisteina.

DMT1 (Divalent metal transporter) è un trasportatore per cationi divalenti. Isolato dall¿intestino ha una distribuzione ubiquitaria. Come componente delle vescicole endocitotiche, partecipa all¿assorbimento di ferro nel trasporto mediato da transferrina trasferendo il Fe2+ nel citoplasma, ed è accertato il suo ruolo nell¿assorbimento intestinale di Fe2+, mentre non è ancora definito il suo coinvolgimento nell¿assorbimento di metalli tossici. È nota la proprietà di aminoacidi di legare metalli, in particolare la cisteina può formare legami covalenti come pure legami ionici con metalli divalenti. In alcuni trasportatori di metalli i domini per il legame dei substrati contengono due o più cisteine. L¿analisi della sequenza di DMT1 evidenzia che la proteina contiene diversi residui di cisteina, compresi o meno in un motivo significativo. Scopo di questo progetto è l¿identificazione del ruolo dei residui di cisteina nell¿attività di trasporto di DMT1 ed in particolare nel determinare la selettività tra i possibili substrati. A tal fine verranno creati mutanti della proteina nativa i cui residui di cys saranno sostituiti da serina. Il trasporto mediato da DMT1 è elettrogenico e ciò consente l¿utilizzo dell¿elettrofisiologia per studiare le cinetiche del trasporto, verranno inoltre applicate tecniche di radio-biochimica e immunoistochimica utilizzando il sistema di espressione eterologa in oociti di Xenopus laevis. Rilevanza. A livello intestinale DMT1 media l¿assorbimento di Fe2+, più difficile è definire il ruolo di DMT1 rispetto a possibili substrati quali Hg2+, Pb2+, Cd2+, Ni2+, Zn2+, Mn2+, Cu2+, alcuni tossici per l¿organismo. Inoltre, l¿interazione tra trasporto di metalli e trasporto di ferro può essere causa di alterazioni del livello di espressione di DMT1 e quindi del metabolismo del ferro. Lo studio proposto permetterà di chiarire il ruolo di DMT1 nella tossicità di metalli pesanti.