Meccanismi patogenetici responsabili dell¿attivazione endoteliale nella vasculopatia associata alla Sindrome da Anticorpi Antifosfolipidi (APS): studi in vitro per la caratterizzazione del/i recettore/i per beta2 glicoprotiena I (b2GPI) e del loro ruolo nell¿attivazione endoteliale indotta dall¿interazione tra anticorpi antifosfoplipidi (aPL) e b2GPI. Valutazione di nuovi approcci terapeutici per il controllo dell'attivazione endoteliale da aPL.
ProgettoL'APS è caratterizzata da trombosi e aborti ricorrenti in presenza di aPL. Il legame degli aPL al loro target antigenico principale, la b2GPI adesa alle cellule endoteliali (EC), induce una perturbazione in gran parte responsabile dello stato trombofilico [Meroni et al Curr Opin Rheumatol 2001;13:377]. Sono stati proposti recettori diversi per b2GPI: eparansolfato e Anessina A2 sulle EC [Meroni et al Lupus 2003;12:1; Zhang et al Blood 2005;105:1964] e recettore di tipo 2 di apolipoproteina E (apoER2) sulle piastrine [Lutters et al J Biol Chem 2003;278:33831]. Toll-like Receptor 4 (TLR-4), ligando di LPS, funge da co-recettore nel signaling endoteliale indotto dagli aPL che riconoscono la b2GPI [Raschi et al Blood 2003;101:3495; Zhang J et al Blood 2004;104:83].
Scopo dello studio è caratterizzare i recettori di b2GPI e valutare nuovi approcci terapeutici per il controllo dell'attivazione endoteliale indotta da aPL/anti-b2GPI.
Saranno condotti studi: a) di valutazione del legame di b2GPI a EC umane di diversa origine: da vena di cordone ombelicale e microcircolo dermico o cerebrale; b) di inibizione competitiva del legame EC/b2GPI mediante: anticorpi specifici per i recettori candidati (TLR-4, Annessina A2, ApoER2); un antagonista comune dei recettori per LDL (Receptor Associated Protein, RAP) e un peptide sintetico di 20 aa derivato da CMV, TIFI, con regioni di omologia con il PL-binding site di b2GPI coinvolto nel legame alle EC e in grado di inibire gli effetti trombogenici e l'attivazione endoteliale degli aPL/anti-b2GPI in modelli murini in vivo [Pierangeli et al. J Autoimmun 2004; 22:217].
Lo studio consentirà di caratterizzare il/i recettore/i coinvolto/i nell'interazione b2GPI-aPL/anti-b2GPI con tipi diversi di EC e di valutare nuove strategie terapeutiche per l'APS.
Scopo dello studio è caratterizzare i recettori di b2GPI e valutare nuovi approcci terapeutici per il controllo dell'attivazione endoteliale indotta da aPL/anti-b2GPI.
Saranno condotti studi: a) di valutazione del legame di b2GPI a EC umane di diversa origine: da vena di cordone ombelicale e microcircolo dermico o cerebrale; b) di inibizione competitiva del legame EC/b2GPI mediante: anticorpi specifici per i recettori candidati (TLR-4, Annessina A2, ApoER2); un antagonista comune dei recettori per LDL (Receptor Associated Protein, RAP) e un peptide sintetico di 20 aa derivato da CMV, TIFI, con regioni di omologia con il PL-binding site di b2GPI coinvolto nel legame alle EC e in grado di inibire gli effetti trombogenici e l'attivazione endoteliale degli aPL/anti-b2GPI in modelli murini in vivo [Pierangeli et al. J Autoimmun 2004; 22:217].
Lo studio consentirà di caratterizzare il/i recettore/i coinvolto/i nell'interazione b2GPI-aPL/anti-b2GPI con tipi diversi di EC e di valutare nuove strategie terapeutiche per l'APS.