PRECURSORI ENDOTELIALI CIRCOLANTI (CEP) E CELLULE ENDOTELIALI CIRCOLANTI (CEC) NEL SARCOMA DI KAPOSI CLASSICO
Progetto Il sarcoma di Kaposi (KS) è una malattia linfangioproliferativa multifocale associata ad infezione da HHV8. In presenza di una disregolazione immune, le proteine oncovirali di HHV-8 promuoverebbero la trasformazione delle ¿spindle-cells¿, elementi tipici del KS con caratteristiche tipiche endoteliali e monocitarie. E¿ verosimile che cellule infettate e trasformate da HHV-8 nel midollo osseo, di stipite per ora indefinito, siano responsabili della disseminazione per via ematica delle lesioni di KS. I nostri studi si stanno focalizzando sulle cellule endoteliali circolanti (CEC) e sui loro precursori (CEP). Abbiamo precedentemente dimostrato che nei pazienti con KS sono aumentate le cellule CD34+ circolanti, che contengono progenitori endoteliali; le CEP, di origine midollare e dotate di potenziale proliferativo; le CEC, più mature e di proveninenza verosimilmente vascolare. Ci proponiamo di approfondire gli studi sugli elementi endoteliali circolanti, analizzando le EC ottenute da coltura di sangue periferico.
La ricerca sarà condotta su pazienti con KS classico a diverso stadio evolutivo. Saranno svolte le seguenti tappe operative:
- separazione dei PBMC ed ottimizzazione dei protocolli di coltura per ottenere a) cellule simil-endoteliali (ELC) risultanti dal differenziamento di monociti, caratterizzate dalla coespressione di marcatori endoteliali e monocitari; b) l¿isolamento delle CEP, derivanti direttamente dai progenitori midollari, e dotate di potenziale proliferativo;
- caratterizzazione immunofenotipica e funzionale delle ELC e delle CEP, comprensiva di valutazione delle capacità di adesione, migrazione, proliferazione, vasculogenesi in vitro, produzione citochinica, infezione da HHV-8;
- confronto delle cellule ottenute dai pazienti e da adeguati controlli.
Obiettivo finale della ricerca è verificare la possibile esistenza di un progenitore di origine midollare HHV8-infetto e indagarne i possibili rapporti con i precursori endoteliali circolanti.