Effetti dello stato di nutrizione sulla qualità e l¿espressione genica dell¿ovocita di pecora
Progetto È stato dimostrato che lo stato di nutrizione della madre influenza la funzione riproduttiva (Rae et al, 2002a), la pressione sanguigna (Gopalakrishnan et al., 2004) e il comportamento (Erhard et al., 2004) della prole durante la vita adulta.
È noto che l¿espressione genica negli ovociti durante la crescita follicolare è sensibile alle variazioni dell¿ambiente e che tali variazioni si ripercuotono sul successivo sviluppo (Hytell, 2000). Fino ad ora gli effetti della nutrizione sull¿espressione genica dell¿ovocita non sono noti.
Il presente progetto prevede l¿analisi quantitativa dell¿espressione di geni selezionati (tra i quali PTX 3, PTGS2, HAS2, GDF9, BMP15, KIT e KIT-L) in ovociti e relative cellule del cumulo di pecora. La scelta dei geni da analizzare è basata su recenti studi che hanno associato i livelli di espressione di tali trascritti con lo sviluppo embrionale nella specie umana e murina (Kawamura et al., 2005). Nell¿ambito del presente progetto verrà inizialmente condotta un¿analisi preliminare per la determinazione delle omologie geniche della pecora con altre specie e per la costruzione di primers adeguati.
Per il presente progetto verrá utilizzato un gruppo di 16 animali di comprovata fertilità. Gli animali verranno sottoposti per un periodo di 2 settimane ad un trattamento nutrizionale pari a 0.5/Kg vivo (n=10) o 1.5/Kg vivo (n=6). Contemporaneamente il ciclo riproduttivo verrá sincronizzato tramite l¿inserimento di spugne intravaginali. Al termine di questo periodo gli animali saranno sacrificati e i complessi cumulo-ovocita verranno immediatamente aspirati da follicoli di diametro > 2.5 mm. Gli ovociti verranno separati dalle cellule del cumulo e i campioni saranno processati separatamente per l¿analisi quantitativa dell¿espressione dei geni sopra indicati.
Lo studio proposto verrá effettuato in collaborazione con il gruppo del Prof. S. Rhind del Macaulay Institute - Aberdeen (UK).