Il Fe è essenziale per gli organismi viventi. Nell'uomo la sua carenza provoca anemia e nel bambino ritarda lo sviluppo intellettivo; tuttavia un suo accumulo è causa di danno cellulare come nell'emocromatosi ereditaria. Nell'uomo per l'assenza di meccanismi regolatori di escrezione del Fe, l'omeostasi è affidata al controllo dell'assorbimento intestinale, nel primo tratto del duodeno.
DMT1 (Divalent Metal Transporter) è ritenuto responsabile del trasporto rapido di Fe(II) attraverso la membrana apicale dell'enterocita.
DMT1 è stato individuato in vari tessuti. La presenza nel SNC lo rendono interessante per il suo possibile coinvolgimento in patologie del sistema stesso. Il Fe è una specie altamente reattiva che può reagire con H2O2 e produrre OH* secondo la reazione di Fenton. Nel morbo di Parkinson è stato riscontrato un accumulo di Fe ed un aumento dell¿ossidazione di lipidi, proteine e acidi nucleici nei neuroni della substantia nigra. DMT1 è una proteina di 561 aminoacidi con 12 domini transmembranari, siti di glicosilazione nella quarta ansa extracellulare e un consensus transport motif situato nella quarta ansa intracellulare.
Scopo della presente ricerca è l¿individuazione di meccanismi regolatori agenti direttamente su DMT1. Ci si propone di:
- analizzare la sensibilità del trasportatore, espresso in oociti di Xenopus laevis, all¿azione di agenti ossidanti;
- studiare (metodi radiochimici) il trasporto di alcuni metalli bivalenti (Fe2+, Zn2+, etc.);
- caratterizzare elettrofisiologicamente il trasportatore;
- analizzare le proprietà di mutanti al fine dell'individuazione del sito regolatore della proteina.
Gli studi fino ad ora effettuati mostrano che (4): a) l'attività di DMT1 è modulata da composti che influenzano il suo stato red-ox; b) Fe e Zn sono entrambi trasportati da DMT1; c) trattamenti con H2O2 e Hg2+ riducono l'attività di DMT1.
Esperimenti preliminari con mutanti indicano il ruolo fondamentale della cisterna in posizione 248.
DMT1 (Divalent Metal Transporter) è ritenuto responsabile del trasporto rapido di Fe(II) attraverso la membrana apicale dell'enterocita.
DMT1 è stato individuato in vari tessuti. La presenza nel SNC lo rendono interessante per il suo possibile coinvolgimento in patologie del sistema stesso. Il Fe è una specie altamente reattiva che può reagire con H2O2 e produrre OH* secondo la reazione di Fenton. Nel morbo di Parkinson è stato riscontrato un accumulo di Fe ed un aumento dell¿ossidazione di lipidi, proteine e acidi nucleici nei neuroni della substantia nigra. DMT1 è una proteina di 561 aminoacidi con 12 domini transmembranari, siti di glicosilazione nella quarta ansa extracellulare e un consensus transport motif situato nella quarta ansa intracellulare.
Scopo della presente ricerca è l¿individuazione di meccanismi regolatori agenti direttamente su DMT1. Ci si propone di:
- analizzare la sensibilità del trasportatore, espresso in oociti di Xenopus laevis, all¿azione di agenti ossidanti;
- studiare (metodi radiochimici) il trasporto di alcuni metalli bivalenti (Fe2+, Zn2+, etc.);
- caratterizzare elettrofisiologicamente il trasportatore;
- analizzare le proprietà di mutanti al fine dell'individuazione del sito regolatore della proteina.
Gli studi fino ad ora effettuati mostrano che (4): a) l'attività di DMT1 è modulata da composti che influenzano il suo stato red-ox; b) Fe e Zn sono entrambi trasportati da DMT1; c) trattamenti con H2O2 e Hg2+ riducono l'attività di DMT1.
Esperimenti preliminari con mutanti indicano il ruolo fondamentale della cisterna in posizione 248.