TRATTAMENTO COMBINATO DI D-LIMONENE E RADIAZIONI IONIZZANTI IN LINEE CELLULARI CANCEROSE DI PANCTREAS, PAN1.MODULAZIONE DEL METABOLISMO DELLA CERAMIDE COME STRATEGIA PER INDURRE RADIOSENSIBILITA'

Il tumore al pancreas, rimane uno dei più difficili da trattare e da curare. Il limonene è un terpene naturale, abbondante nella scorza di alcuni agrumi ed in particolare del limone. Fra le varie proprietà di questa molecola vi è quella di esibire un potenziale chemioterapico e chemiopreventivo in pazienti con tumori al seno. Molti meccanismi sono stati invocati essere alla base degli effetti antitumorali del limonene. Fra questi: 1) l¿inibizione dell¿isoprenilazione posttranslazionale di alcune proteine regolatorie della crescita quale il Ras ; 2) la diminuzione dei livelli di mRNA della ciclica D1.Inoltre il limonene inibisce la migrazione di cellule normali mammarie, senza influire sull¿adesione cellulare.Molti autori riportano l¿efficacia di cotrattamenti farmacologici e irraggiamento, in quanto riportano fenomeni di resistenza nei tumori mammari prostatici e di pancreas. Molti esempi sono ormai noti in letteratura sul ruolo antiproliferativo e proapoptotico di un lipide naturale, il ceramide.Il livello di ceramide intracellulare dipende da molti stimoli, alcuni dei quali sono originati da prodotti lipidici di origine naturale, quali il resveratrolo e la vitamina D.Per questo il ceramide è stato definito un lipide oncosoppressore.Ai fini di una corretta chemioprevenzione da parte di composti naturali risulta pertanto necessario individuarne il meccanismo molecolare che induce arresto della crescita o apoptosi in cellule tumorali. Con questa ricerca ci si propone di testare l¿effetto antiproliferativo e proapoptotico di d-limonene su cellule di tumore di pancreas da solo e combinato ad irradiazione con rx (9 Gy).Questo tumore risulta essere ormone-dipendente e presenta molte similitudini nella risposta ad agenti chemioterapici o chemiopreventivi.L¿arresto della crescita sarà studiata mediante test SRB e di clonogenicità.L¿attività proapoptotica verrà studiata mediante GACS e PARP cleavage test. In seguito a risultati positivi del limonene, si indagherà l¿aumento intracellulare di ceramide mediante reazione della diacilglicerolo-chinasi.Le potenziali ricadute di questa ricerca consistono nella possibilità di testare in vivo l¿effetto di questo monoterpene sulla crescita del tumore, usando ¿topi nude¿ a cui sono state iniettate le cellule tumorali responsive al limonene e agli rx.