SORVEGLIANZA DEL MORBILLO ED APPROCCI INNOVATIVI DI FILOGENETICA NELL'AMBITO DEL GLOBAL MEASLES STRATEGIC PLAN 2012-2020

1. Introduzione Il morbillo è una malattia infettiva causata da un virus del genere morbillivirus (famiglia dei Paramixovidae) molto contagiosa, prevenibile con la vaccinazione, che presenta i requisiti necessari per l’eliminazione (trasmissione esclusivamente interumana, virus geneticamente stabile, assenza di serbatoi animali o ambientali, periodo di contagiosità breve, immunità permanente conferita dall’infezione, disponibilità di un vaccino efficace e sicuro). In assenza di misure preventive la malattie può avere un grave impatto sulla salute della popolazione. In linea con gli obiettivi della Regione Europea dell’Organizzazione Mondiale della Sanità (OMS), il 23 marzo 2011, è stato approvato il Piano Nazionale per l’Eliminazione del Morbillo e della Rosolia congenita (PNEMoRc) 2010-20. Nel piano, accanto a misure mirate atte ad incrementare le coperture vaccinali per due dosi di vaccino trivalente contro morbillo, parotite e rosolia (MPR), per raggiungere gli obiettivi di eliminazione viene sottolineata l’importanza della sorveglianza. In previsione dell’obiettivo di eliminazione risulta infatti fondamentale un sistema di sorveglianza sensibile in grado, non solo di individuare tempestivamente tutti i nuovi casi di morbillo, ma anche di valutare la circolazione dei diversi genotipi virali. Nei paesi in via di eliminazione la sorveglianza molecolare gioca dunque un ruolo fondamentale per valutare la circolazione dei ceppi endemici, identificare i casi di importazione e la loro provenienza. 2. Scopo Descrivere il profilo epidemiologico e virologico del morbillo in Lombardia nel biennio 2013-2014 e caratterizzare molecolarmente i ceppi di morbillivirus al fine di genotipizzarli, analizzarli filogeneticamente e studiarne le caratteristiche evolutive. 3. Materiali e metodi Sono stati analizzati i campioni respiratori e/o da urina provenienti da pazienti con una diagnosi sospetta di morbillo, raccolti nell’ambito del sistema di sorveglianza integrata per il morbillo e la rosolia della regione Lombardia da luglio 2013 a novembre 2014. I campioni sono stati sottoposti a estrazione dell'RNA e a successiva amplificazione genica mediante real-time RT-PCR per l’identificazione degli acidi nucleici del virus del morbillo e del virus della rosolia. Per valutare la variabilità genetica e l’evoluzione molecolare dei morbillivirus circolanti in Lombardia tutti i campioni risultati positivi sono stati sottoposti a nested PCR per l’amplificazione di un frammento del gene N. gli amplificati sono stati sequenziati e l’analisi delle sequenze ottenute è stata condotta attraverso diversi programmi bioinformatici. 4. Risultati Da luglio 2013 a novembre 2014 in Lombardia sono stati segnalati 596 casi di morbillo, l’11.4% (68/596) delle segnalazioni di morbillo è risultato negativo agli esami di laboratorio e quindi classificato come non caso. Pertanto i casi di morbillo (possibili, probabili e confermati) in Lombardia nel periodo in studio sono stati complessivamente 528 (88,6%; 528/596). La maggior parte dei casi (359 casi, pari al 68%) si è verificata nella fascia di età 15-39 anni. Il 9% dei casi (47) è stato osservato in bambini sotto i cinque anni, di cui il 6,4% (3/47) in pazienti con meno di un anno. Complessivamente 401 casi segnalati (75,9%) erano non vaccinati, 50 casi (9,5%) avevano ricevuto una dose di vaccino e 3 (0,6%) due dosi. Come centro di riferimento regionale per la