Studio della funzionalità del sistema GABAergico nel Sistema nervoso Periferico mediante l'utilizzo di topi transgenici con mutazione condizionale per il recettore GABA-B1 nelle cellule di Schwan
ProgettoLe neuropatie periferiche sono un problema di salute di eziologia eterogenea per le quali non sono ancora disponibili trattamenti affidabili.
Sulla base dei nostri risultati, i ligandi GABAergici potrebbero essere nuovi fattori promettenti per la terapia . La rilevanza del sistema GABAergico , infatti , è stata recentemente dimostrato nel PNS .
In particolare , i recettori GABA - A e GABA - B sono funzionalmente attivi nelle cellule di Schwann , dove partecipano nel controllo della proliferazione cellulare e mielinizzazione .
Studi molto recenti eseguiti in topi GABA-B1 ko hanno rivelato che diversi parametri biochimici, morfologici e funzionali del PNS dipendono recettori GABA - B .
Per esempio GABA-B1 ko mostrano alterazioni morfologiche e molecolari di mielina, inclusi cambiamenti nell'espressione delle proteine della mielina PMP22 e P0 .
Inoltre, le piccole fibre mieliniche e piccoli neuroni DRG risultano più abbondanti in GABA-B1 ko.
Pertanto, i topi GABA-B1 ko mostrato guaine mieliniche alterate, anche se un coinvolgimento del compartimento neuronale del PNS (ad esempio, i piccoli neuroni DRG o motoneuroni ) potrebbe essere ipotizzato.
Complessivamente i nostri dati hanno evidenziato l'importanza dei recettori GABA-B nella mielinizzazione .
del SNP. Tuttavia, questi topi presentano cambiamenti delle funzioni sensoriali, sostenendo il ruolo dei recettori GABA-B anche nella nocicezione periferica.
Per quanto riguarda la nocicezione , è ben noto che i pazienti CMT presentano sintomi di dolore neuropatico, tra cui bruciore o disestesie di piedi e mani.
Al fine di considerare i diversi aspetti di questo nuovo sistema GABAergico , il ruolo del recettore GABA-B in nella fisiologia del SNP verrà ulteriormente analizzato nei topi condizionali che specificamente non hanno il recettore GABA-B1 in cellule di Schwann o in motoneuroni.
Il gene knockout condizionale rappresenta un approccio efficace per studiare la funzione dei singoli geni nel sistema nervoso (Gavériaux - Ruff C. , 2007) .
Il sistema Cre-loxP è una tecnologia per il controllo spaziale e temporale di inattivazione genetica.
Con questo approccio, i topi con siti LoxP fiancheggianti il gene GABA-B saranno incrociati rispettivamente con i topi P0-Cre (per specifiche knockout GABA-B1 nelle cellule di Schwann) o con HB9-Cre (per knockout specifico
in motoneuroni).
Questi topi saranno studiati per la biochimica, morfologica e morfometrica, comportamentale e analisi nocicettiva del PNS. I dati preliminari già ottenuti in topi condizionale P0-Cre/GABA-B1 fl/fl in cellule di Schwann suggeriscono fortemente che queste cellule sono colpite.
Questi topi condizionali hanno mostrato una diminuzione dello spessore della mielina, con anomalie, delaminazioni e apoptosi nelle cellule di Schwann.
L'incremento fibre amieliniche si basa fortemente su una correlazione con lo stato iperalgesico osservato.
I dati indicano che la morfologia nei topi P0-CRE/GABA-B1 è diverso da quello precedentemente pubblicato per il ko GABA - B1 - / - mice e merita ulteriori indagini.
La nostra ricerca sarà indirizzata a individuare nuove possibili strategie terapeutiche per il trattamento delle neuropatie periferiche (come le malattie CMT), la gestione del dolore cronico associato e la gestione del fenotipo.
Questa è una sfida per i neurologi base, in quanto una terapia affidabile di queste patologie non è ancora disponibile e il nostro progetto può contribuire alla comprensione dei meccanismi relativi alle malattie neuromuscolari.