APPLICAZIONE DELLA SPETTROSCOPIA 15N NMR ALLA DETERMINAZIONE DELLA STRUTTURA DI DERIVATI DI NUCLEOSIDI PURINICI SOSTITUITI ALLE POSIZIONI N-9 O N-7 DELLA BASE

Analoghi modificati di nucleosidi, sostituiti sulla base purinica nella posizione N-9,sono stati ampiamente studiati per l'attività biologica, soprattutto come composti anticancro e antivirali. Gli analoghi sostituiti nella posizione N-7 non sono stati altrettanto studiati, se non contesto del trasferimento del glicosile da N-9 a N-7 o come sottoprodotti nella sintesi di composti sostituiti in N-9. Il metodo usato per la preparazione delle adenine alchilate in N-9 prevede la alchilazione della nucleobase in ambiente basico e la regioselettività di questa reazione dipende sia dalle condizioni di reazione e sia dalla natura della base purinica. Nella maggior parte dei casi come sottoprodotto della reazione di alchilazione in N-9 si ottengono anche regioisomeri come i prodotti sostituiti in N-7. E' quindi di estremo interesse sapere con esattezza quale è il prodotto o come è costituita la miscela dei prodotti ottenuti. Lo studio degli spettri NMR è fondamentale per una corretta attribuzione delle posizioni del sostituente sulla base purinica. Studi NMR del 13C di molecole sostituite in N-7 o in N-9 hanno mostrato differenze (7-10 ppm) diagnostiche di spostamento chimico di alcuni atomi di C della base purifica. Tuttavia lo studio dei chemical shifts dei protoni e dei carboni dà informazioni solo indirette sulla posizione dell'azoto nello scheletro della base. La determinazione degli spostamenti chimici del 15N dei regioisomeri sostituiti in N-9 e in N-7 di purine sostituite finora studiati mostra, come previsto, una drammatica differenza di spostamento chimico degli N in posizione 7 e in posizione 9 ( differenze di 80-110 ppm). Obbiettivo di questo progetto è studiare l'NMR del 15N ad abbondanza naturale di analoghi di adenosine da noi sintetizzati, regioisomeri in N-7 e in N-9. La struttura di questi composti sarà determinata anche con lo studio del 1H- e 13C- NMR. A tal fine si utilizzeranno tecniche sia mono che bidimensionali. I valori di spostamento chimico di idrogeno, carbonio 13 e azoto 15 saranno determinati con tecniche bidimensionali di correlazione protone-protone (COSY, NOESY), protone-carbonio(HSQC, HMBC)e protone-azoto(HSQC, HMBC). L'apparecchiatura usata è un spettrometro ad alti campi Bruker AVANCE 500, con probe broadband reverse e gradienti di campo magnetico. La frequenza di risonanza del protone è 500.13 MHz, quella del carbonio 125.76 MHz e quella dell'azoto 50.68 MHz.