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  1. Projects

STUDIO DELLA LOCALIZZAZIONE DI SEQUENZE MICROCHIMERICHE NELLA SPECIE BOVINA

Project
I microchimerismi (presenza in un individuo di cellule o DNA appartenenti ad un individuo geneticamente distinto) materno e fetale, noti da numerosi anni nella specie umana, sono stati recentemente dimostrati anche nella specie bovina. Data l'importanza di questa specie in campo agroalimentare e il crescente impiego delle biotecnologie a scopo produttivo e riproduttivo, diventa importante conoscere le implicazioni pratiche di tali tecniche nel caso della produzione di animali clonati o transgenici. Nonostante la barriera multistrato rappresentata dalla placenta bovina, è stato dimostrato passaggio transplacentare di materiale genetico tra il feto e la madre. Tale evidenza è stata valutata mediante ricerca di sequenze di DNA esogeno nel sangue intero e nel siero di bovine riceventi di feti transgenici, ma anche in madri naturali di vitelli maschi. Nelle prime sono state ricercate sequenze di transgene, nelle seconde sequenze del cromosoma Y. Risulta a questo punto importante determinare se tale passaggio è transiente oppure il materiale genetico permane nel tempo, come nell'uomo, e determinare un'eventuale localizzazione preferenziale in tessuti o organi specifici. Per verificare tali problematiche, con questo progetto si intende determinare mediante Real-Time PCR e FISH (Fluorescence In Situ Hybridization) la presenza di transgene all'interno di diversi tessuti e organi prelevati da bovine risultate microchimeriche dai test sul sangue. Bovine madri naturali di vitelli maschi e bovine riceventi di feti transgenici sono state sacrificate due anni dopo il parto per il prelievo di un vasto pannello di tessuti e organi da testare. La ricerca delle sequenze esogene nei campioni verrà effettuata con l¿uso di sonde specifiche per le due tecniche sopra indicate. In particolare per la ricerca delle sequenze derivanti dai feti maschi nelle madri si utilizzerà una sonda nucleotidica marcata basata sulla sequenza unica maschile S4 del cromosoma Y; per la ricerca delle sequenze derivanti dai feti transgenci si utilizzerà una sonda nucleotidica marcata basata sul transgene. In parallelo i test verranno eseguiti sui controlli negativi costituiti dagli stessi organi e tessuti prelevati da femmine mai gravide e sui controlli positivi prelevati da maschi e bovini transgenici rispettivamente.
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Overview

Contributors

TURIN LAURETTA   Scientific Manager  

Type

PUR20062008 - PUR 2006-2008

Date/time interval

April 18, 2007 -
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