INTERAZIONE TRA RECETTORE TOLL-LIKE 5 E RECETTORE TOLL-LIKE 9 NELLA ATTIVAZIONE DELLA RISPOSTA IMMUNITARIA
ProjectPRESUPPOSTI:La capacità del sistema immunitario di riconoscere e rispondere a pattern molecolari presenti sui patogeni è in gran parte dovuta ai recettori Toll-like (TLRs). Nei patogeni di norma sono presenti contemporaneamente più pattern molecolari e pertanto da un singolo patogeno vengono attivati TLRs differenti.
DESCRIZIONE: Per valutare le interazioni della attivazione di differenti TLRs nella risposta immunologica verranno utilizzati due agonisti dei TLRs, la flagellina e gli oligonucleotidi contenenti sequenze CpG (CpG-ODN). La flagellina, agonista del TLR5, è espressa da patogeni sia procariotici che eucariotici, mentre sequenze di DNA contenenti nucleotidi CpG non metilati, agonisti del TLR9, sono presenti prevalentemente nei patogeni procariotici. Le cellule immunitarie, isolate dal sangue periferico di donatori, nel loro insieme e dopo averle separate nelle varie popolazioni e sottopopolazioni- quali ad esempio linfociti, monociti , cellule dendritiche, cellule natural killer- verranno stimolate con flagellina, con oligonucleotidi contenenti sequenze CpG, e con i due TLRs agonisti insieme. L¿interazione tra flagellina e CpG-ODN verrà valutata analizzando vari parametri della risposta immunitaria quali : proliferazione, produzione di citochine e chemochine, attività citotossica, attività NK, induzione di popolazioni linfocitarie Th1-Th2, influenza sulle cellule con attività regolatoria ed altro.
OBIETTIVO Identificare sinergismi ed antagonismi tra i due agonisti di TLRs. L¿identificazione delle interazioni tra TLR 5 e 9, oltre ad fornire conoscenze su come il sistema immunitario integrando i vari segnali riesca a generare la risposta più appropiata per combattere un determinato patogeno, permetterà di acquisire informazioni utili per la valutazione di un possibile utilizzo in campo oncologico della associazione flagellina/ CpG-ODN.
DESCRIZIONE: Per valutare le interazioni della attivazione di differenti TLRs nella risposta immunologica verranno utilizzati due agonisti dei TLRs, la flagellina e gli oligonucleotidi contenenti sequenze CpG (CpG-ODN). La flagellina, agonista del TLR5, è espressa da patogeni sia procariotici che eucariotici, mentre sequenze di DNA contenenti nucleotidi CpG non metilati, agonisti del TLR9, sono presenti prevalentemente nei patogeni procariotici. Le cellule immunitarie, isolate dal sangue periferico di donatori, nel loro insieme e dopo averle separate nelle varie popolazioni e sottopopolazioni- quali ad esempio linfociti, monociti , cellule dendritiche, cellule natural killer- verranno stimolate con flagellina, con oligonucleotidi contenenti sequenze CpG, e con i due TLRs agonisti insieme. L¿interazione tra flagellina e CpG-ODN verrà valutata analizzando vari parametri della risposta immunitaria quali : proliferazione, produzione di citochine e chemochine, attività citotossica, attività NK, induzione di popolazioni linfocitarie Th1-Th2, influenza sulle cellule con attività regolatoria ed altro.
OBIETTIVO Identificare sinergismi ed antagonismi tra i due agonisti di TLRs. L¿identificazione delle interazioni tra TLR 5 e 9, oltre ad fornire conoscenze su come il sistema immunitario integrando i vari segnali riesca a generare la risposta più appropiata per combattere un determinato patogeno, permetterà di acquisire informazioni utili per la valutazione di un possibile utilizzo in campo oncologico della associazione flagellina/ CpG-ODN.