PRECURSORI ENDOTELIALI CIRCOLANTI (CEP) E CELLULE ENDOTELIALI CIRCOLANTI (CEC) NEL SARCOMA DI KAPOSI CLASSICO
Progetto La ricerca, iniziata lo scorso anno, è in fase di avanzamento.
Presupposti: Il sarcoma di Kaposi (KS) è una malattia linfangioproliferativa multifocale associata ad infezione da herpesvirus umano 8 (HHV8). Elementi tipici delle lesioni KS sono le ¿spindle-cells¿, cellule di verosimile origine endoteliale che sono costantemente infettate dal virus. Numerose osservazioni suggeriscono che le spindle-cells derivino da progenitori endoteliali infettati da HHV8, anche se finora i reservoirs cellulari del virus e l¿esatta natura dei precursori delle spindle-cells non sono stati definiti con certezza.
Obiettivo della ricerca: studiare le cellule endoteliali circolanti (CEC) e i precursori endoteliali circolanti (CEP) in pazienti affetti da KS classico, verificandone la frequenza, lo stato di infezione da HHV8, le caratteristiche immunofenotipiche e funzionali.
Descrizione della ricerca: Lo svolgimento della ricerca prevede diverse tappe operative da condurre su pazienti con KS classico a diverso stadio evolutivo:
- separazione dei PBMC ed ottimizzazione dei protocolli di coltura per ottenere a) cellule simil-endoteliali (ELC) risultanti dal differenziamento di monociti, caratterizzate dalla coespressione di marcatori endoteliali e monocitari; b) l¿isolamento delle CEP, derivanti direttamente dai progenitori midollari, e dotate di elevato potenziale proliferativo;
- caratterizzazione immunofenotipica e funzionale delle ELC e delle CEP, comprensiva di valutazione delle capacità di adesione, migrazione, proliferazione, vasculogenesi in vitro, produzione di citochine e fattori angiogenici, infezione da HHV-8;
- confronto delle cellule ottenute dai pazienti e da adeguati controlli.
Stato di avanzamento della ricerca: durante il primo anno sono stati ottimizzati i protocolli di coltura delle CEP e delle ELC. Si è osservato che sia le CEC che le CEP sono più numerose nel sangue periferico dei pazienti rispetto ai controlli. Dati preliminari sembrerebbero indicare che le CEP dei pazienti con KS, e non dei controlli, siano infettate, seppur a bassa carica virale, da HHV8. Sono in corso esperimenti per confermare questi risultati e per definire le caratteristiche dell¿infezione. Si procederà poi come da programma alla caratterizzazione funzionale delle cellule, con particolare attenzione anche al potenziale differenziativo delle CEP verso lineages ematopoietici.