STUDIO DELLA ATTIVAZIONE SEQUENZIALE DI CASCATE DI TRASDUZIONE CHE REGOLANO L¿ESPRESSIONE GENICA DA PARTE DI FARMACI ANTIDEPRESSIVI

Obiettivo di questo progetto e' lo studio dell¿azione dei farmaci antidepressivi sulle cascate di trasduzione di segnale che regolano l'espressione genica e la neuroplasticita'. Dato che l'effetto terapeutico degli antidepressivi si manifesta solo dopo alcune settimane di trattamento, e' opinione comune degli studiosi che modificazioni nell'espressione genica siano implicate in questi effetti. In particolare alcuni lavori hanno riportato che gli antidepressivi, attraverso una amplificazione della cascata di cAMP-PKA, incrementano l'attivita' trascrizionale di CREB, che a sua volta regola l'espressione di geni coinvolti nella neuroplasticita', come il fattore neurotrofico BDNF. Nel corso di un precedente lavoro abbiamo trovato un effetto selettivo di farmaci proserotonergici e pronoradrenergici sulla fosforilazione di CREB e l'espressione di BDNF ma, al contrario di quanto postulato da altri, non abbiamo riscontrato modificazioni nello stesso senso nella cascata di cAMP-PKA (Tiraboschi et al., 2004). Dato che alcuni recenti lavori su culture neuronali e con l'uso di topi knockout dimostrano chiaramente che non tanto cAMP-PKA, ma le cascate di CaM kinasi kinasi-CaM kinasi IV e di Ras-MAP kinasi, sono principalmente responsabili della regolazione di CREB nei neuroni, analizzeremo l'effetto dei trattamenti cronici con antidepressivi su queste cascate di trasduzione e sulla espressione e fosforilazione di CREB. Inoltre, dato che e' stato suggerito che l'espressione di BDNF, uno dei bersagli finali dell'attivazione di CREB, e' regolata in modo diverso a seconda della lunghezza dei trattamenti farmacolgici con antidepressivi, la fosforilazione di CREB nonche' la misura dell'espressione degli mRNA di CREB e BDNF verranno effettuate dopo una settimana, due, o tre settimane di trattamento con diversi farmaci antidepressivi, e infine dopo una settimana di washout del farmaco successiva alle tre settimane di trattamento. Anche la attivazione delle principali cascate di trasduzione (v. sopra) verra¿ misurata nelle stesse condizioni temporali. Complessivamente, questo studio permettera' di misurare l¿effetto temporale della somministrazione di farmaci antidepressivi sulle principali cascate di trasduzione che regolano l¿espressione genica e la neuroplasticita¿, sulla attivazione della espressione genica e sulla produzione del fattore neurotrofico BDNF, contribuendo a chiarire il meccanismo d¿azione di questi farmaci utilizzati da un gran numero di pazienti psichiatrici.