Il plasma arricchito in piastrine come coadiuvante negli impianti di matrice ossea demineralizzata: studi in vivo

Le parodontopatie, principale causa di edentulismi parziali o totali, sono malattie infiammatorie croniche che interessano le strutture di sostegno dei denti, caratterizzate dalla distruzione dell¿osso degli alveoli dentali. Diversi studi clinici hanno dimostrato che una matrice ossea demineralizzata e/o un osso demineralizzato costituiscono un buon materiale da innesto per indurre i processi di riparo nelle parodontopatie. Si tratta di osso naturale, dal quale è stata eliminata la componente inorganica mediante un processo di demineralizzazione: la componente organica dell¿osso, costituita da collagene e altre proteine, rimane inalterata e con essa i fattori di crescita e osteoinduttivi necessari per la continua crescita ossea e per i processi di riparo. Entrambi questi tipi di materiali sono quindi usati nelle ricostruzioni ossee per le loro proprietà osteoinduttive e per la loro capacità di venire completamente integrati nel tessuto presente nel sito di innesto. Lo scopo di questo progetto è la messa a punto di un sistema in vivo per valutare il potenziamento e il miglioramento della risposta del tessuto ospite all¿impianto di matrice ossea demineralizzata, mediante l¿aggiunta, nel sito di innesto, di fattori potenzialmente in grado di facilitare il processo di neoformazione ossea. Verrà utilizzato, come matrice, un biomateriale noto per la facile integrazione nel sito di lesione ossea e per essere un valido induttore di nuova sintesi ossea (Dynagraft): valuteremo il possibile effetto osteoinduttore del PRP, o dei fattori di crescita in esso presenti, misurato come richiamo di cellule mesenchimali e loro differenziazione in osteoblasti. Verrà inoltre valutata la capacità di questi composti di attivare e mantenere il processo di ossificazione. Il modello che ci proponiamo di adottare prevede l¿utilizzo di animali da esperimento, topi o ratti, mantenuti nello stabulario del nostro Istituto. Dopo anestesia, l¿innesto di sfere di Dynagraft verrà effettuato nel muscolo femorale mediante incisione della cute e della sottostante capsula muscolare. L¿innesto verrà sottoposto ad un trattamento ripetuto con PRP autologo o eterologo, o con una miscela dei fattori di crescita più abbondanti nel PRP mediante iniezione localizzata. Gli animali verranno sacrificati a tempi diversi. Gli innesti ed il tessuto circostante verranno espiantati, fissati in formalina e sezionati per la successiva analisi istologica. Per la generica valutazione dell¿aspetto morfologico del tessuto circostante l¿innesto, le fettine di tessuto verranno colorate con ematossilina-eosina ed osservate al microscopio ottico. La presenza e la quantità di cellule mesenchimali nell¿innesto, nonchè la loro successiva differenziazione in osteoblasti, verranno valutate mediante l¿individuazione di marker specifici. L¿identificazione e la quantificazione dei depositi di calcio nel tessuto verranno valutate mediante la colorazione di VonKossa e controcolorazione con ematossilina-eosina.