Valutazione dell¿espressione di L1 (CD171) e della beta-catenina nei mesoteliomi maligni (MM).

INTRODUZIONE: le basi molecolari della nota aggressività e resistenza alle attuali terapie del mesotelioma maligno (MM) sono ampiamente ignote, e potrebbero risiedere in difetti di complessi processi cellulari come l¿adesione cellulare. L¿iperespressione della molecola di adesione L1 appare correlata ad un incremento della proliferazione e della invasività di alcune neoplasie maligne umane. Recentemente, in linee cellulari di carcinoma del colon, è stata documentata l¿attivazione di L1 da parte del complesso trascrizionale beta-catenina-TCF. Una iperespressione di L1 è stata descritta in un numero esiguo di MM, a fronte di una negatività nel mesotelio normale. Scopo del presente studio è la valutazione dell¿espressione dei geni L1 e beta-catenina nei MM sia da un punto di vista proteico mediante immunoistochimica su tissue microarrays (TMA) che trascrizionale, con metodica real time RT-PCR, non esistendo al momento dati in letteratura in merito. MATERIALI E METODI: casistica: 150 MM d¿archivio inclusi in paraffina, con noti parametri clinicopatologici e 30 campioni tissutali di MM congelati in azoto liquido e conservati a ¿80°C; metodi: 1a) immunoistochimica: metodica ABC standard con immunocoloratore automatico BioGenex, anticorpi mono- e policlonali diretti contro la molecola intera e la porzione extracitoplasmatica di L1 e contro la beta-catenina, sistema di rivelazione Envision/HMP, cromogeno: DAB, suTMA (materiale paraffinato); 1b) real time RT-PCR (campioni congelati); 2) analisi statistica:opportune valutazioni statistiche per valutare la significatività: dei risultati immunoistochimici (previa analisi dell¿intensità e della percentuale di cellule neoplastiche immunoreattive) e dei livelli quantitativi del messaggero dei geni d¿interesse con i dati clinico-patologici, correlazione dei dati immunoistochimici e molecolari dello studio. OBIETTIVI: -selezione e revisione dei casi d¿archivio, identificazione delle aree da prelevare per l¿assemblaggio del TMA; -valutazione dell¿espressione proteica dei geni selezionati; valutazione quantitativa molecolare dei geni d¿interesse; -analisi statistica dei risultati.