L'orticaria cronica (OC) è definita dalla presenza di lesioni pomfoidi pruriginose per più di 6 settimane. La forma idiopatica non ha cause identificabili. E' una condizione relativamente frequente che può compromettere seriamente la qualità della vita. In circa un terzo di questi soggetti sono stati dimostrati autoanticorpi diretti verso il frammanto Fc del recettore delle IgE (FceRI)o verso le IgE stesse. In questo caso l'orticaria viene definita autoimmune. La presenza di questi anticorpi viene rivelata con un test in vivo di intradermoreazione con siero autologo. Il corrispettivo test in vitro misura il rilascio di istamina da parte di basofili umani incubati con plasma del paziente. In circa la metà dei casi non vi è sovrapposizione di risultati tra i due test. Queste discrepanze e la carenza di informazioni sulla patogenesi dell'OC ci ha spinto a studiare il sistema della coagulazione sulla scia di diverse osservazioni cliniche e sperimentali. L'eparina è in grado di inibire entrambi i test in vitro e in vivo e la terapia anticoagulante si è rivelata efficace nella cura dell'OC in casi sporadicamente descritti.
Scopo dello studio: analizzare il coinvolgimento del sistema della coagulazione nella patogenesi dell'orticaria cronica.
Obbiettivi dello studio e disegno sperimentale.
- Studio dell'attivazione della coagulazione mediante dosaggio dei prodotti di attivazione della protrombina (F1+2) con sandwich ELISA
- Studio della fibrinolisi mediante dosaggio dei prodotti di degradazione della fibrina con dosaggio del d-dimero con sandwich ELISA
- Studio della via di attivazione della coagulazione (intrinseca/estrinseca) mediante dosaggio del Fattore VII attivato con 1-stage prothrombin-time¿based assay e del fattore XII attivato mediante ELISA
- Dimostrazione del coinvolgimento della coagulazione a livello del pomfo mediante analisi immunoistochimica dell'espressione di tissue factor su biopsie cutanee di pazienti con OC
- Dimostrazione di una attività direttamente permeabilizzante dei plasmi mediante incubazione su monolayer di cellule endoteliali da cordone ombelicale (HUVEC) e da microcircolo cutaneo (HDMEC) con dosaggio di un tracciante (albumina fluorescinata)in un sistema transwell
- Dimostrazione, da parte di plasmi incubati con linee mastocitarie umane in vitro, di una attività di stimolo e rilascio di mediatori dell'infiammazione con:
a) dimostrazione dell'attività biologica dei surnatanti mediante il sistema di permeabilizzazione delle cellule endoteliali prima descritto
b) parziale identificazione dei mediatori con uso di inibitori, farmaci, enzimi, anticorpi monoclonali (anti-H1, anti-leucotrieni, istaminasi, anticorpi monoclonali)