Valutazione dei meccanismi molecolari di incrementata produzione di Endotelina 1 in cellule endoteliali HLA B35+

Presupposti Il gene HLA B35 è stato associato con lo sviluppo di ipertensione polmonare secondaria a sclerosi sistemica (1). L¿endotelina 1 è il determinante patogenetico fondamentale nella sviluppo di ipertensione polmonare. In un recente lavoro abbiamo osservato come cellule endoteliali ECV 304 stabilmente transfettate con l¿antigene di classe prima HLA B35 presentino un¿incrementata produzione del trascritto genico della PRE-PRO-endotelina 1 e della proteina endotelina 1 sotto stimolo infiammatorio indotto da interleuchina 1 ß (2). Obiettivo Studiare a quale livello della via di produzione dell¿endotelina 1 avviene la modulazione mediata dall¿HLA-B35. Metodi Nello studio verranno impiegate linee cellulare ECV 304 e HUVEC stabilmente transfettate con HLA-B35; verranno utilizzate come controlli cellule transfettate con HLA B8 o linee3 transfettate con il solo vettore. Dopo stimolo con interleuchina 1 si valuterà se l¿iperproduzione di endotelina 1 sia imputabile ad un¿aumentata attività dell¿ enzima convertitore dell¿endotelina (ECE) oppure sia dovuta ad un¿aumentata produzione di mRNA mediata da un¿incrementata concentrazione di c-jun e c-fos, fattori trascrizionali nucleari fondamentali nell¿attivazione della regione promoter del gene della PRE-PRO-endotelina 1. 1. Scorza R, Caronni M, Bazzi S, Nador F, Beretta L, Antonioli R, et al. Post-menopause is the main risk factor for developing isolated pulmonary hypertension in systemic sclerosis. Ann N Y Acad Sci. 2002;966:238-46. 2. Santaniello A, Salazar G, Lenna S, Antonioli R, Colombo G, Beretta L, et al. HLA-B35 upregulates the production of endothelin-1 in HLA-transfected cells: a possible pathogenetic role in pulmonary hypertension. Tissue Antigens. 2006;68:239-44.