L¿ipofertilità maschile è una problematica di grande rilievo prima di tutto in campo umano, dove si presenta come sindrome eterogenea la cui patofisiologia resta spesso sconosciuta (Bahsin e coll., 2000). Poiché lo sviluppo delle cellule germinali richiede l¿espressione coordinata di vari prodotti genici a livello ipotalamico, ipofisario e testicolare, si ritiene che nelle varie forme di ipofertilità maschile sia implicato un grande numero di geni, per la cui individuazione sono di grande utilità i modelli animali. Ad esempio ricerche nei topi (knock out e mutanti) mostrano che numerosi geni possono essere responsabili di una ridotta spermatogenesi (Kim e coll., 1998).
Con la presente ricerca si intende studiare il polimorfismo di alcuni geni candidati allo scopo di valutarne l¿influenza sulla fertilità maschile nel coniglio.
In particolare, inizialmente verranno studiati i geni che codificano per due recettori di membrana espressi nel testicolo: FAS, coinvolto nella segnalazione intracellulare che conduce all¿apoptosi, e c-kit (Stem Cell Factor Receptor), essenziale nella normale ematopoiesi, nella melanogenesi e nella gametogenesi.
Il progetto prevede:
1) analisi comparativa dei geni in questione nelle specie animali meglio note, per l¿ individuazione delle regioni in cui con maggior probabilità possono trovarsi sequenze nucleotidiche dotate di polimorfismo (SNP e/o INDEL);
2) progettazione di PCR specifiche per l¿individuazione di polimorfismi nelle regioni suddette;
3) A - analisi del DNA genomico di un congruo numero di conigli maschi, alla ricerca di polimorfismi nelle regioni prescelte; B - analisi convenzionali del materiale seminale prelevato a diverse età da ciascun individuo.
4) analisi statistica dei risultati.
Risultati attesi: validazione dei polimorfismi individuati nei geni e analisi della variabilità delle caratteristiche del materiale seminale, anche in relazione alla presenza dei vari polimorfismi genetici.
Con la presente ricerca si intende studiare il polimorfismo di alcuni geni candidati allo scopo di valutarne l¿influenza sulla fertilità maschile nel coniglio.
In particolare, inizialmente verranno studiati i geni che codificano per due recettori di membrana espressi nel testicolo: FAS, coinvolto nella segnalazione intracellulare che conduce all¿apoptosi, e c-kit (Stem Cell Factor Receptor), essenziale nella normale ematopoiesi, nella melanogenesi e nella gametogenesi.
Il progetto prevede:
1) analisi comparativa dei geni in questione nelle specie animali meglio note, per l¿ individuazione delle regioni in cui con maggior probabilità possono trovarsi sequenze nucleotidiche dotate di polimorfismo (SNP e/o INDEL);
2) progettazione di PCR specifiche per l¿individuazione di polimorfismi nelle regioni suddette;
3) A - analisi del DNA genomico di un congruo numero di conigli maschi, alla ricerca di polimorfismi nelle regioni prescelte; B - analisi convenzionali del materiale seminale prelevato a diverse età da ciascun individuo.
4) analisi statistica dei risultati.
Risultati attesi: validazione dei polimorfismi individuati nei geni e analisi della variabilità delle caratteristiche del materiale seminale, anche in relazione alla presenza dei vari polimorfismi genetici.