Tra i modelli anatomici esistenti, le colture organotipiche tridimensionali di mucosa orale mantenute con interfaccia aria-liquido rappresentano l'approccio sperimentale ex vivo più fedele alla situazione fisiologica. Tale modello consente di approfondire numerosi aspetti nel campo della biologia orale grazie al mantenimento dell'organizzazione tridimensionale esistente in vivo e all'interazione epitelio-mesenchimale necessaria alla maturazione dei cheratinociti.
Lo scopo generale di questa ricerca è la caratterizzazione morfologica di colture organotipiche di mucosa orale umana normale in condizioni sperimentali standardizzate. Ciò consentirebbe di superare le limitazioni etiche e pratiche insite negli studi in vivo. Lo scopo specifico di questa ricerca è lo studio della proliferazione epiteliale in tali colture organotipiche dopo incorporazione dell¿analogo non radioattivo della timidina, la bromodesossiuridina. Verranno analizzate anche le proprietà di adesione intercellulare nel compartimento epiteliale. Per i nostri studi saranno prelevati frammenti di mucosa orale cheratinizzata dalla zona frontale, premolare, molare o retromolare dell¿arcata dentaria superiore o inferiore di pazienti sane e non fumatrici con età compresa tra i 30 e 40 anni (n=5). I frammenti di mucosa orale (circa 1 cm2) saranno posizionati con la porzione epiteliale rivolta verso l¿alto in un sistema Transwell, consentendo di avere un¿interfaccia aria-liquido che riproduca fedelmente la condizione fisiologica. Dopo una notte di incubazione, le colture saranno poi mantenute in vitro per 6 e 24 ore ed i campioni saranno processati per l¿analisi istologica ed immunofluorescenza.
Lo scopo generale di questa ricerca è la caratterizzazione morfologica di colture organotipiche di mucosa orale umana normale in condizioni sperimentali standardizzate. Ciò consentirebbe di superare le limitazioni etiche e pratiche insite negli studi in vivo. Lo scopo specifico di questa ricerca è lo studio della proliferazione epiteliale in tali colture organotipiche dopo incorporazione dell¿analogo non radioattivo della timidina, la bromodesossiuridina. Verranno analizzate anche le proprietà di adesione intercellulare nel compartimento epiteliale. Per i nostri studi saranno prelevati frammenti di mucosa orale cheratinizzata dalla zona frontale, premolare, molare o retromolare dell¿arcata dentaria superiore o inferiore di pazienti sane e non fumatrici con età compresa tra i 30 e 40 anni (n=5). I frammenti di mucosa orale (circa 1 cm2) saranno posizionati con la porzione epiteliale rivolta verso l¿alto in un sistema Transwell, consentendo di avere un¿interfaccia aria-liquido che riproduca fedelmente la condizione fisiologica. Dopo una notte di incubazione, le colture saranno poi mantenute in vitro per 6 e 24 ore ed i campioni saranno processati per l¿analisi istologica ed immunofluorescenza.