REAZIONI CATALIZZATE DALL' ENZIMA PURINA NUCLEOSIDE FOSFORILASI (PNP) SU INOSINE E GUANOSINE MODIFICATE NELLE POSIZIONI 2',3' E 5'

Premessa. La purina nucleoside fosforilasi (PNP), un enzima chiave nel metabolismo purinico, e' responsabile della via di salvataggio delle basi puriniche alternativa alla biosintesi de novo. La PNP catalizza la reazione reversibile di rottura del legame glicosidico C-N, in presenza di ortofosfato.In vivo la reazione e' irreversibile in quanto accoppiata ad altre due reazioni enzimatiche, l'ossidazione e la fosforilazione della base purinica liberata. L'interesse biomedico per questa classe di enzimi deriva dal fatto che inibitori specifici potrebbero potenziare l'effetto terapeutico di analoghi di nucleosidi purinici ad attivita' antivirale ed antitumorale impedendo la rottura del legame glicosidico delle molecole farmacologicamente attive e la loro conseguente inattivazione. Scopo del lavoro. Sara' quello di studiare la reazione catalizzata dall'enzima PNP su inosine e guanosine modificate nella sola porzione ribosidica. Inizialmente si pensa di preparare derivati che presentino gruppi protettivi in posizione 2',3' ingombranti come, ad esempio, la 2',3'-O-isopropilidene inosina e guanosina. Successivamente verranno sintetizzati semplici derivati dell'inosina e della guanosina che conservino alternativamente gruppi ossidrilici liberi nelle varie posizioni della porzione ribosidica. Infine si procedera' alla sintesi di 5'-deossi analoghi. Per tutti questi composti sintetizzati sara' valutata l'azione dell'enzima. Materiali, Metodi, Fasi. Nella prima fase di questa ricerca si sintetizzeranno semplici analoghi dell'inosina e della guanosina nei quali i gruppi ossidrilici verranno variamente protetti. In una seconda fase si studieranno le condizioni di reazione tra i diversi substrati sintetizzati e la PNP. Obiettivo specifico. Si perseguira' il duplice obiettivo sia di studiare semplici vie di sintesi di derivati modificati nella porzione ribosidica di inosina e guanosina sia di effettuare studi di correlazioni attivita'-struttura della PNP.