ANALISI DEL SINAPTOPROTEOMA DI UN MODELLO ANIMALE DI DEPRESSIONE CON INTERAZIONE GENE-AMBIENTE

Questa ricerca consiste di una analisi proteomica globale di un modello animale di depressione con interazione di vulnerabilita¿ genetica e stress. Scopo principale della ricerca e¿ identificare e validare biomarcatori correlati sia con l¿efficacia che con la resistenza al trattamento della depressione con farmaci tradizionali. Il modello animale e¿ costituito dai ratti Flinders Sensitive Line (FSL) e dai controlli FRL; i ratti FSL sono caratterizzati da un tratto di vulnerabilita¿ genetica (iperresponsivita¿ agli agenti colinergici) che si ritrova in una larga percentuale di pazienti depressi. I ratti FSL verranno sottoposti ad una procedura di separazione dalla madre nelle prime due settimane di vita, che riproduce gli eventi avversi postnatali nell¿uomo, implicati nell¿insorgenza della depressione in eta¿ adulta. I ratti verranno successivamente trattati cronicamente con farmaci antidepressivi di riferimento. Sara¿ cosi¿ possible confrontare animali con vulnerabilita¿ di base, animali in cui lo stress postnatale e¿ stato aggiunto alla vulnerabilita¿ e gli effetti dei trattamenti nei due casi. Risultati preliminari hanno mostrato che in questo modello alcuni biomarcatori di vulnerabilita¿ non sono ripristinati dai farmaci. Dai diversi gruppi sperimentali verranno purificati mediante centrifugazione su gradiente di Percoll i terminali sinaptici (sinaptosomi) dell¿ippocampo. L¿analisi dei sinaptosomi consentira¿ di studiare una popolazione di proteine fortemente arricchita in proteine sinaptiche. Sui diversi gruppi sperimentali verra¿ effettuata una analisi proteomica globale, mediante elettroforesi bidimensionale accoppiata con spettrometria di massa. Questa analisi permettera¿ di individuare le proteine che vengono up- o down-regolate in conessione con la vulnerabilita¿ di base, l¿interazione gene-ambiente e i trattamenti farmacologici.