La segregazione dei lipidi nella membrana cellulare come un possibile meccanismo per la creazione di complessi di signaling tra differenti sistemi recettoriali di membrana

Presupposti: I recettori tirosina cinasici (RTK) e quelli accoppiati a proteine G (GPCR) sono le due principali classi di recettori della superficie cellulare coinvolti nelle risposte a vari stimoli di tipo mitogeno o differenziativo. Numerose evidenze indicano che il colloquio tra i moduli di signaling dei RTK e dei GPCR avviene a livelli molteplici. Numerosi RTK e GPCR sono localizzati in subdomini specializzati della membrana plasmatica (¿detergent resistant membranes¿, DRM) caratterizzati da un elevato arricchimento in colesterolo e sfingolipidi, che costituiscono un microambiente all¿interno della membrana plasmatica che consente reciproche interazioni tra molecole proteiche e lipidiche coinvolte nel controllo della trasduzione del segnale, e i dati sopra ricordati suggeriscono che i DRM potrebbero rappresentare il sito cellulare dove vengono formati e regolati i complessi RTK/GPCR, e suggeriscono che altre componenti (proteine o lipidi) di questo compartimento cellulare potrebbero partecipare al signaling integrato RTK-GPCR. Descrizione della ricerca: Ci proponiamo: 1) di caratterizzare la composizione molecolare di DRM ottenuti da differenti tipi cellulari, in condizioni basali o in seguito a stimolazione; 2) di isolare complessi di signaling GPCR/RTK da fonti differenti, in condizioni basali o stimolate; 3) di identificare eventuali proteine associate con i complessi GPCR/RTK nei DRM preparati da fonti differenti, in condizioni basali o stimolate; in particolare studieremo l¿eventuale associazione funzionale con le proteine della via di segnalazione di Src; 4) di studiare le interazioni tra gli sfingolipidi e i complessi di GPCR/RTK nei DRM preparati da fonti differenti, in condizioni basali o stimolate. Obiettivi: Questo studio ha lo scopo di investigare il possibile ruolo della segregazione dei lipidi della membrana cellulare come un possibile meccanismo per la creazione di complessi di signaling tra differenti sistemi recettoriali di membrana.