ANALISI LONGITUDINALE DEL COINVOLGIMENTO DEI RECETTORI GABA-B NEL PROCESSO DI MIELINIZZAZIONE DEL SISTEMA NERVOSO PERIFERICO: STUDIO IN VITRO ED IN VIVO

Di recente è stato dimostrato che gli steroidi neuroattivi, quali il progesterone e il suo derivato tetraidroprogesterone (THP), modulano il processo di mielinizzazione nel sistema nervoso periferico (SNP). Questo avviene in parte attraverso dei meccanismi d¿azione che coinvolgono i recettori GABA, di tipo A (GABA-A-r) e di tipo B (GABA-B-r). Allo scopo di identificare nuove terapie per le patologie in cui il SNP è compromesso, come le malattie demielinizzanti, i traumi periferici o le neuropatie ereditarie, abbiamo studiato il ruolo dei GABA-B-r nel SNP, soprattutto a livello delle cellule di Schwann. Con il FIRST 2003 e 2004, abbiamo dimostrato che i GABA-B-r sono presenti nel SNP, mediano la proliferazione delle cellule di Schwann e l¿espressione di proteine fondamentali della mielina (Magnaghi V., Eur. J. Neurosci., 2004). Si è osservato che il THP, con un meccanismo GABA-A-r mediato, modula l¿espressione dei GABA-B-r (Magnaghi V., J. Mol. Neurosci., 2006). Inoltre, si è osservato che i topi GABA-B-r knock-out (FIRST 2005) presentano delle alterazioni biochimiche e morfologiche dei nervi periferici (Magnaghi V., Glia, 2006, submitted). A livello del SNP, quindi, i GABA-B-r sembrano controllare la mielinizzazione. Obiettivo - Nel ratto la mielinizzazione del SNP inizia peri-natalmente e si completa nelle prime due settimane di vita. Il ruolo dei GABA-B-r nella mielinizzazione, verrà valutato longitudinalmente in modelli di studio in vitro ed in vivo. Metodologia - Colture di cellule di Schwann da gangli dorsali di feti al 17° giorno, indotte a mielinizzare in vitro, verranno valutate per l¿espressione dei GABA-B-r mediante immunoistochimica. Le cellule verranno trattate con l¿agonista GABA-B-r baclofene, valutandone la proliferazione e l¿indice di mielinizzazione nel tempo. Lo studio longitudinale in vivo dei GABA-B-r sarà poi condotto su nervo sciatico di ratto ai giorni 0, 5, 10, 20 e 90 post-natale, mediante analisi immunoistochimica e western.