Espressione dei fattori di trascrizione fos e c-jun del complesso AP-1 nelle popolazioni linfocitarie delle donne affette da endometriosi

RAZIONALE: Nel 2005, con il più alto numero di firme mai raggiunte per un problema sanitario, i membri del Parlamento Europeo hanno firmato una Dichiarazione per l¿ endometriosi che chiedeva agli organi costituzionali di prenderne coscienza in quanto patologia debilitante che affligge in Europa 14 milioni di donne. Le donne affette sono peraltro a rischio per patologie autoimmuni e neoplastiche. Per individuare le alterazioni molecolari alla base delle patologie associate all¿endometriosi, in un precedente studio abbiamo eseguito un¿ analisi del profilo di espressione genica dei linfociti periferici di donne con endometriosi prima e dopo l'intervento di eradicazione della patologia. I fattori di trascrizione c-jun e fos che formano il complesso AP1 sono risultati essere espressi in maniera aberrante in questa popolazione cellulare. Questo complesso trascrizionale regola la proliferazione e differenziazione e la sua espressione aumentata può favorire l¿oncogenesi in vari tipi cellulari. OBIETTIVI: In questo studio, verrà indagata in modo accurato l¿espressione di c-jun e fos nelle cellule mononucleate di sangue periferico delle donne con endometriosi. L¿espressione verrà valutata tanto a livello di RNA, che di proteina e si cercherà di verificare quale delle diverse popolazioni linfocitarie è implicata nella espressione aberrante del complesso AP1. MATERIALI E METODI: · Cellule mononucleate del sangue periferico verranno ottenute da donne con endometriosi grave e da donne di controllo prive della patologia mediante separazione su gradiente di Ficoll di sangue periferico previo consenso informato. · Le popolazioni cellulari verranno ottenute mediante metodo immunomagnetico utilizzando specifici anticorpi capaci di riconoscere le varie sottopopolazioni di cellule T, B e NK. · L¿espressione genica verrà indagata mediante real-time PCR utilizzando primers specifici mentre la presenza della proteina verrà indagata mediante western blot e immunoistochimica.