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  1. Projects

Morfologia delle vie di endocitosi in protoplasti di tabacco

Project
L¿endocitosi, nelle piante, è un importante meccanismo cellulare che partecipa a diversi processi fondamentali per la cellula. La maggior parte delle conoscenze sui processi di endocitosi in studi ultrastrutturali nelle piante sono stati condotti con l¿utilizzo di sonde che coinvolgono esclusivamente vie di endocitosi clatrina-dipendente. Positively o Negatively Charged Nangold rappresentano sonde non specifiche per lo studio dei processi di internalizzazione: essi interagiscono con molecole caricate negativamente o positivamente sulla membrana plasmatica indipendentemente dalla loro natura (proteine, lipidi o carboidrati) consentendo così di non discriminare tra singole vie di endocitosi. Grazie ad esse è stato possibile a livello ultrastrutturale, seguire il processo di internalizzazione di tratti di membrana plasmatica e la loro destinazione all¿interno della cellula caratterizzando la morfologia di diversi compartimenti endocitotici progressivamente coinvolti nel processo di internalizzazione. Le osservazioni sono state completate con analisi quantitative per meglio definire la dinamica dei processi di internalizzazione e distribuzione all¿interno della cellula. Gli studi sono tutt¿ora in corso per caratterizzare meglio i compartimenti coinvolti nei processi di internalizzazione con l¿utilizzo di anticorpi specifici per discriminare, attraverso tecniche di immunofluorescenza ed immunogold, i diversi endosomi successivamente coinvolti nel processo endocitotico. La specificità di tali anticorpi verrà testata tramite immunoblot. Allo stesso modo verrà meglio definito il coinvolgimento di diversi processi di endocitosi nell¿internalizzazione del Nanogold con l¿utilizzo di un inibitore del processo clatrina-dipendente che consentirà di evidenziare l¿ingresso ed i compartimenti interni coinvolti in processi clatrina-indipendenti. Tali analisi al TEM (sia qualitative che quantitative) saranno accoppiate ad esperimenti di immunogold con anticorpi anti-clatrina.
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Overview

Contributors

ONELLI ELISABETTA   Scientific Manager  

Type

PUR20062008 - PUR 2006-2008

Date/time interval

June 12, 2006 - August 1, 2007

Project duration

13 months
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