Sviluppo di un vaccino ricombinante per la mastite ovina da Staphylococcus aureus a partire dai geni codificanti per i principali antigeni immunodominanti
Progetto Il progetto ha come obiettivo generale lo sviluppo di vaccini ricombinanti per la mastite ovina da Staphylococcus aureus in alternativa ai vaccini stabulogeni. Il progetto ha come ulteriore obiettivo la generazione di nuove conoscenze sugli antigeni immunodominanti del microrganismo. Il progetto si compone di tre UO, con UNIMI come UO3. Gli obiettivi specifici del progetto sono i seguenti: 1) associazione dell’isolamento clinico del batterio con il prelievo del sangue dall’animale malato, in modo da avere la correlazione ceppo-andamento anticorpale; 2) ottenimento e caratterizzazione della sequenza amminoacidica delle principali proteine immunodominanti; 3) analisi computazionale delle proteine sequenziate; 4) disegno dei primers e produzione delle proteine ricombinanti. Le attività progettuali sono inquadrate in 4 WP. WP1: Prelievo di latte e sangue dall’animale con mastite clinica, riconducibile a S. aureus, in diverse aree delle Sardegna. I prelievi verranno effettuati di concerto con i servizi veterinari. Coinvolgerà UO1 e UO2. WP2: Analisi fenotipica dei ceppi di S. aureus mediante SDS-PAGE e Immunoblotting con i sieri provenienti dagli animali dai quali si è isolato il ceppo. Taglio, elettroeluizione e concentrazione delle proteine da inviare al sequenziamento amminoacidico. Sequenziamento e analisi computazione delle proteine. Coinvolgerà UO1 e UO3 (UNIMI). WP3: Disegno dei primers e produzione di proteine ricombinanti. Coinvolgerà UO1 e UO3 (UNIMI). WP4: Elaborazione dei dati, stesura relazione intermedia e finale. Coinvolgerà tutte le UO.