INTRODUZIONE:
La sopravvivenza e l¿armonico sviluppo fetale dipendono dal corretto funzionamento dei meccanismi di immunotolleranza all'interfaccia materno-fetale. La patologia da difetto d'impianto, è una manifestazione delle alterazioni di questo meccanismo. Nella gravidanza fisiologica esiste una fine regolazione molecolare dell'equilibrio tra immunotolleranza e apoptosi nel distretto placentare; difetti di espressione di molecole apoptotiche sono state correlate ad alcune patologie gravidiche. Survivin è una proteina della famiglia IAP (Inhibitor of Apoptosis Protein) implicata nella regolazione sia della proliferazione cellulare (che stimola), che dell'apoptosi (che inibisce), e con ruolo cruciale recentemente descritto come regolatore del sistema di tolleranza immunitaria nell'uomo. Una peculiare distribuzione spazio-temporale di Survivin appare necessaria alla maturazione corretta della placenta; una sua iperespressione è stata osservata nella patologica pre- e neoplastica placentare. Survivin interagisce col sistema apoptotico Fas-FasL, importante nell'impianto e nello sviluppo placentare attraverso la regolazione dei processi invasivi del trofoblasto ed il rimodellamento delle arterie spirali, la cui ridotta espressione è stata riscontrata in placente con difetti di immunotolleranza. Scopo del presente studio è la valutazione dell¿espressione di Survivin sia da un punto di vista proteico che trascrizionale, nella patologia placentare da difetto di impianto, non esistendo al momento alcun dato in merito in letteratura.
MATERIALI E METODI: casistica: 100 tessuti placentari d¿archivio inclusi in paraffina, con alterazioni morfologiche da difetto d'impianto relative alle diverse fasi della gravidanza; 30 campioni tissutali di placente da gravidanze con difetto d'impianto e non, congelate in azoto liquido e conservate a '80°C; metodi: 1a) immunoistochimica: metodica ABC standard con il kit LSAB (DAKO) eseguita con immunocoloratore automatico, utilizzando l'anticorpo policlonale diretto contro la proteina survivin (Novus Biologicals, Littleton, CO, 1:200) su sezioni istologiche di 5 micron di spessore, sistema di rivelazione Envision/HMP, cromogeno: DAB; 1b) real time RT-PCR (campioni congelati); 2) analisi statistica: opportune valutazioni statistiche per valutare la significatività dei risultati immunoistochimici (previa analisi della sede nucleare e/o citoplasmatica dell'immunoreattività, intensità e percentuale di cellule immunoreattive) e dei livelli quantitativi di Survivin mRNA con i dati clinico-patologici, e la correlazione dei dati immunoistochimici e molecolari. OBIETTIVI: -selezione e revisione dei casi d¿archivio; -valutazione dell'espressione proteica di Survivin; valutazione quantitativa molecolare del messaggero di Survivin; -analisi statistica dei risultati.