PRECURSORI ENDOTELIALI CIRCOLANTI E INFEZIONE DA HERPESVIRUS-8 (HHV-8): CARATTERIZZAZIONE DELL'INFEZIONE IN RAPPORTO ALLO SVILUPPO E ALL'EVOLUZIONE DEL SARCOMA DI KAPOSI.
Progetto Il sarcoma di Kaposi (KS) è una malattia linfangioproliferativa multifocale associata ad infezione da herpesvirus umano 8 (HHV-8). Elementi tipici delle lesioni KS sono le "spindle-cells", cellule di verosimile origine endoteliale che sono costantemente infettate dal virus. Studi recentemente condotti nel nostro laboratorio hanno dimostrato che le cellule progenitrici endoteliali circolanti ottenute da coltura di cellule mononucleate di sangue periferico (late-EPC) di pazienti affetti da variante classica di KS sono infettate persistentemente da HHV-8. Questa osservazione supporterebbe l'ipotesi che le spindle-cells derivino da progenitori endoteliali infettati, che darebbero origine alle lesioni sarcomatose una volta localizzati in sedi permissive. Tuttavia ulteriori studi sono necessari per definire le tappe principali del ciclo biologico dell'infezione da HHV-8 in vivo e la relazione esistente tra infezione virale e trasformazione neoplastica delle cellule infette.
Pertanto, con la presente ricerca intendiamo caratterizzare dettagliatamente l'infezione da HHV-8 dei precursori circolanti delle cellule endoteliali, attraverso lo svolgimento delle seguenti tappe:
- analizzare l'infezione da HHV-8 delle late-EPC in una casistica più ampia di pazienti con KS, al fine di valutare la presenza di eventuali correlazioni con parametri clinici di malattia;
- caratterizzare lo stato di infezione delle late-EPC, descrivendone la fase litica o latente;
- estendere lo studio a soggetti con infezione da HHV-8 senza KS;
- verificare l'infettabilità in vitro di late-EPC ottenute da soggetti sani HHV-8 negativi, confrontate con cellule endoteliali mature;
- valutare gli eventuali effetti di tale infezione su late-EPC e cellule endoteliali mature;
- analizzare il DNA di late-EPC infettate da HHV-8 in vivo (ottenute da pazienti con KS) o in vitro, per la ricerca di alterazioni del DNA di possibile significato preneoplastico o neoplastico
- valutare gli effetti di possibili fattori favorenti, quali citochine proinfiammatorie, fattori angiogenici ed ipossia, sulle caratteristiche dell'infezione da HHV-8, sulla proliferazione e sull'eventuale trasformazione neoplastica.
L'obiettivo della ricerca è comprendere la rilevanza dell'infezione da HHV-8 dei progenitori endoteliali nello sviluppo e nell'evoluzione del KS.