STUDIO DEL COMPLESSO LIGANDO-RECETTORE INSL3-LGR8 NELLA DISCESA DEL TESTICOLO DEL CANE, E POSSIBILE COINVOLGIMENTO CAUSATIVO NEL CRIPTORCHIDISMO
Progetto Molte delle tappe che segnano il differenziamento, lo sviluppo e la successiva discesa del testicolo nel cane sono noti, così come i loro tempi. In questa specie, la gonade bipotenziale, abbozzata nella regione sottolombare, è differenziata in testicolo a 36 giorni di sviluppo fetale e tra il 36° e il 46° giorno il comparto endocrino testicolare inizia l'increzione ormonale. Nel 3°-4° giorno post parto il testicolo attraversa il canale inguinale e a 35 giorni di vita postnatale raggiunge la localizzazione scrotale. Nelle specie esorchidi la discesa del testicolo si svolge in due fasi: nella prima il testicolo rimane ancorato alla zona inguinale attraverso lo sviluppo del gubernaculum, e si ha la regressione del legamento sospensore craniale. La seconda fase, inguino-scrotale, dipende dagli androgeni testicolari, e si completa in epoca diversa secondo la specie. La funzionalità del comparto endocrino, sia quello di pertinenza delle cellule di Leydig sia quello riferibile alle cellule di Sertoli, è fondamentale per il completo sviluppo della gonade, per la sua discesa nello scroto e per l'acquisizione dei caratteri sessuali secondari. Errori durante i processi di differenziamento, così come del trasferimento transaddominale della gonade si possono verificare anche con una certa frequenza nella specie canina, e conducono al verificarsi di casi di criptorchidismo e di intersessualità.
Il peptide insulin-like 3 (INSL3), membro della famiglia delle relaxine, è ritenuto fondamentale nel processo di discesa del testicolo. Anomalie del gene insl3 o del suo recettore rxfp2 (precedentemente denominato lgr8) sono state ritenute responsabili del criptorchidismo addominale nell'uomo, dovuto a mancato differenziamento dei gubernacula. INSL3 è stato dimostrato nelle cellule di Leydig fetali ed adulte in molte specie e circostanze sia normali che patologiche, e recentemente il complesso INSL3/LGR8 è stato indicato come un ulteriore sistema paracrino ormone-recettore che convoglia l¿informazione sullo stato delle cellule di Leydig all'epitelio germinativo e come possibile protagonista di un feedback autocrino. Le implicazioni di questo insieme ligando/recettore nella discesa del testicolo sono altrettanto note, ma a nostra conoscenza, il recettore non è mai stato dimostrato con metodiche immunoistochimiche nel gubernaculum testis. Nel cane l'argomento è totalmente inesplorato.
Ci si propone pertanto di studiare immunoistochimicamente la presenza e distribuzione di INSL3 nel testicolo fetale di cane, e la possibile espressione del recettore LGR8 nel gubernaculum dei medesimi soggetti. In parallelo, sarà valutato il comparto endocrino fetale per la attività antimülleriana delle cellule di Sertoli e per l'attività steroidogenica delle Leydig. INSL3 sarà anche testato su testicoli di cani adulti e su quelli ritenuti di cani criptorchidi. I derivati del gubernaculum, il muscolo obliquo interno ed il cremastere saranno valutati per la presenza del recettore LGR8.