STUDIO DELLA SUSCETTIBILITA ALL'INFEZIONE DA M. AVIUM SUBSP. PARATUBERCULOSIS IN TOPI KNOCK OUT PER TIR8 e MYD88.
Progetto La paratubercolosi è una malattia infiammatoria cronica intestinale dei ruminanti, causata da Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) ed è responsabile di gravi perdite economiche in tutto il mondo. Gli animali si infettano da neonati per via oro-fecale, ma la malattia rimane latente anche per diversi anni, senza segni clinici, che appaiono in seguito a fenomeni di stress quali parto, lattazione e malnutrizione. L'insorgenza dei segni clinici e delle lesioni tipiche sembra essere dovuta a una risposta immunitaria eccessiva scatenata dall'attivazione di recettori dell'immunità innata quali Toll-like receptors (TLR) e NOD2. A seguito del riconoscimento di MAP da parte di TLR2, TLR4 e NOD2 si sviluppa una risposta infiammatoria caratterizzata dalla produzione di molecole infiammatorie, tra cui citochine e chemochine, anche ad alti livelli. L'interesse per MAP, oltre che per l'impatto economico sull'allevamento bovino, deriva anche dal fatto che pare sia coinvolto nella patogenesi del Morbo di Crohn dell'uomo.
Il presente studio ha come obiettivo di indagare il ruolo di TIR8/SIGIRR nella patogenesi della paratubercolosi. TIR8 è un membro della superfamiglia TLR/IL-1R con un'attività inibitoria della risposta infiammatoria innescata dagli altri membri della stessa famiglia. TIR8 svolge un ruolo di regolatore della risposta immunitaria, soprattutto a livello delle superfici mucose dove è maggiormente espresso. Inoltre, intendiamo studiare le vie di trasduzione del segnale coinvolte durante l'infezione da MAP, come ad esempio quella dipendente da MyD88, proteina adattatoria fondamentale nella trasduzione del segnale dei TLR.
Allo scopo di studiare se la suscettibilità alla malattia sia influenzata dalla presenza del recettore TIR8 e della molecola adattatoria MyD88, allestiremo un modello di infezione da MAP in vivo, in topi wild type (WT) e in topi deficienti per TIR8 e MyD88. Dopo 3 e 6 mesi gli animali saranno sacrificati e sugli organi prelevati saranno condotte analisi batteriologice e istologiche. Inoltre, mediante Real-Time PCR ed ELISA analizzeremo il profilo di espressione di citochine e chemochine in organi omogenati e nel siero.
I risultati del progetto saranno utili per una miglior comprensione della patogenesi della paratubercolosi, di cui ancora molti aspetti sono sconosciuti. Inoltre, data la funzione regolatrice della risposta immunitaria di TIR8, soprattutto a livello gastroenterico, ci aspettiamo un suo rilevante ruolo nella patogenesi della paratubercolosi, dove lesioni e segni clinici sembrano essere dovuti ad una "sregolata" risposta infiammatoria. Se ciò si rivelasse corretto, TIR8 potrebbe essere studiato come bersaglio di nuovi protocolli terapeutici o come marker di selezione genetica dei bovini, per renderli più resistenti alle malattie alla cui base risulta esservi un'eccessiva risposta infiammatoria. Questi risultati potrebbero aprire la strada allo studio di tale molecola anche in altre specie e patologie.