L¿ambiente dell¿apparato gastro-enterico del pollo è complesso e dinamico con più di 500 differenti specie batteriche ed una presenza di 1012 microrganismi vitali per grammo di digesta: come può l¿intestino mantenere una microflora commensale così composita senza esserne danneggiato? (Donoghue et al. 2006).
Partendo dall¿appurata evidenza della sofisticata interazione tra la microflora intestinale e l¿ospite, così come tra i diversi microrganismi intestinali (Nurmi e Rantala 1973), si vuole studiare i meccanismi di protezione nei confronti dei batteri patogeni indotti dalla cosiddetta esclusione competitiva e, in particolare, saranno misurati i benefici prodotti dalla somministrazione di quantità note di Lactobacillus acidophilus di origine aviaria sull¿ambiente intestinale e sulle performance generali del pollo.
L¿importanza della riduzione dei patogeni intestinali aviari è sottolineata anche dal Reg. (CE) n° 1003/2005 che specificamente richiede entro il 31 dicembre 2009 la riduzione all¿1% o meno dei gruppi di riproduttori della specie Gallus gallus nei confronti di Salmonella Enteritidis, S. Hadar, S. infantis, S. Typhimurium e S. Virchow. Tra le diverse tipologie di pollame allevato a trarre maggior vantaggio dal potenziamento di un meccanismo endogeno di difesa nei confronti delle salmonelle intestinali sarebbe senza dubbio la gallina ovaiola (per la produzione di uova fresche). Il consumo umano di questo prodotto infatti non sempre prevede la completa cottura e risulta quindi necessario assicurare un alto grado di salubrità all¿uovo da bere. Per mettere in relazione le interazione di L. acidophilus con l¿organismo ospite (galline ovaiole commerciali) sarà allestita una prova con gruppi randomizzati (trattati più controllo) al fine di evidenziare:
i parametri zootecnici e quelli sanitari (prestazioni produttive e mortalità);
le qualità organolettiche dell¿uovo;
la carica microbica superficiale e profonda dell¿uovo;
la carica microbica intestinale patogena e no
integrità della muscosa intestinale tramite esame istologico.
Le conte degli enterobatteri, di L. acidophilus e di Clostridium perfringens verrà eseguita secondo la metodica proposta da Zavanella et al. (1983). Subito dopo l¿eutanasia, 1 grammo di ingluvie, duodeno e contenuto ciecale saranno diluiti in 9 ml di soluzione fisiologica sterile per poter poi effettuare diluizioni seriali in base 10. Di ogni diluizione ne verranno seminati 20 µl rispettivamente su:
- Violet Red Bile Agar (VRBA), incubato a 37°C per 24 ore, per la ricerca degli enterobatteri;
- Kanamycin Aesculin Azide Agar addizionato di Kanamycin selective supplement, incubato a 37°C per 24 ore, per la ricerca degli enterococchi;
- MRS Agar, incubato a 37°C in anaerobiosi per 72 ore, per la ricerca dei lattobacilli;
- C. perfringens Agar Base addizionato di D-Cycloserine Antimicrobic Supplement ed arricchito con Egg Yolk Emulsion, incubato a 37°C in anaerobiosi per 24-48 ore per la ricerca di C. perfringens.