Studio multicentrico prospettico sulla caratterizzazione clinica, sierologica e molecolare delle infezioni acute da virus dell¿epatite B (HBV) in Italia.
Progetto Presupposti:
L¿infezione da virus dell¿epatite B (HBV) è stata caratterizzata da diversi decenni, tuttavia alcune importanti questioni che riguardano l¿infezione acuta rimangono ancora aperte, quali ad esempio: a) la frequenza di ceppi mutanti ¿e-minus¿ sostenuti da mutazioni nella regione pre-core/core; b) la presenza di mutanti dell¿antigene di superficie di HBV, in particolar modo a livello del determinante comune ¿a¿; c) la frequenza di genotipi di HBV e la loro correlazione con il decorso clinico; d) la difficoltà nella pratica clinica di poter distinguere una riattivazione di epatite cronica da un¿infezione acuta.
Obiettivi della ricerca:
Lo studio si propone di eseguire una caratterizzazione sierologica, molecolare e clinica su un campione rappresentativo di epatiti acute sintomatiche da HBV in Italia. Gli obiettivi specifici sono: 1) Ottenere un quadro aggiornato sulle caratteristiche virologiche delle ¿nuove¿ infezioni da HBV (mutanti ¿escape" ed ¿e-minus¿, genotipo, durata della viremia); 2) Valutare l¿andamento dei marcatori sierologici di infezione (in particolare i livelli di HBsAg e di IgM anti-HBc) e lo sviluppo dell¿avidità anticorpale anti-HBc (con metodo sperimentale) in corso di infezione acuta; 3) Correlare le caratteristiche virologiche e sierologiche osservate con l¿evoluzione clinica dell¿infezione (gravità, tasso di cronicizzazione).
Descrizione della ricerca:
Lo studio prospettico multicentrico della durata di un anno, prevede l¿arruolamento di circa 200 pazienti in 30 Centri Clinici distribuiti su tutto il territorio nazionale. Di ogni paziente arruolato verrà eseguito un follow-up di 6 mesi (1 anno in caso di HBsAg positività persistente a 6 mesi dal ricovero).
Di ciascun caso arruolato verranno raccolti da parte del centro clinico i dati anamnestici, epidemiologici, clinici e di laboratorio mediante apposite schede. Inoltre, da ogni paziente arruolato verranno raccolti dei campioni di siero al ricovero (T0); a 7, 15 e 30 giorni dal ricovero (T1, T2 e T3, rispettivamente); a 3 e 6 mesi dal ricovero (T4 e T5, rispettivamente) e a 9 e 12 mesi dal ricovero in caso di HBsAg positività persistente al 6° mese (T6 e T7). Su ogni campione raccolto, aliquotato e conservato a -20°C fino alla spedizione al centro di riferimento, verranno eseguite le seguenti analisi di laboratorio: 1) caratterizzazione sierologica dell¿infezione da HBV mediante: a) determinazione quantitativa di HBsAg; b) determinazione quantitativa di anti-HBs; c) ricerca di HBeAg e anti-HBe; d) ricerca di anti-HBc con determinazione sperimentale dell¿avidità anticorpale; e) ricerca semiquantitativa di IgM anti-HBc. 2) Valutazione della viremia mediante real-time PCR. 3) Determinazione del genotipo virale e della presenza di mutazioni a livello della regione pre-core/core e del determinante ¿a¿ dell¿HBsAg sul primo campione positivo per HBV-DNA, mediante analisi delle sequenze virali ottenute.