Rimodellamento della matrice extracellulare in fibroblasti di gengiva umani ottenuti da soggetti anziani: valutazione dell¿effetto della somministrazione di farmaci immunosoppressivi.
Progetto Modificazioni qualitative e quantitative del tessuto connettivo della gengiva sono le principali caratteristiche delle malattie parodontali. In particolare, alterazioni dell¿omeostasi del collagene, che costituisce il principale componente strutturale del tessuto connettivo della gengiva, rappresentano uno degli eventi chiave alla base dello sviluppo di ipertrofia gengivale, una patologia caratterizzata dall¿ accumulo di componenti della matrice extracellulare (in particolare di collagene) nella lamina propria della gengiva.
La popolazione anziana è frequentemente affetta da diverse patologie croniche età-correlate (ad es. ipertensione arteriosa, scompenso cardiaco, demenza, diabete mellito) che, frequentemente, sono tra loro associate (polipatologie), e che richiedono un trattamento polifarmacologico. Le diverse modificazioni farmacocinetiche e farmacodinamiche età-correlate rendono il soggetto anziano maggiormente suscettibile ad effetti collaterali indesiderati della terapia farmacologica, che verosimilmente potrebbero modificare l¿omeostasi del tessuto connettivo della gengiva, essendo il collagene è il principale bersaglio dei farmaci associati allo sviluppo di ipertrofia gengivale.
Dal momento che non sono disponibili dati in letteratura al riguardo, lo scopo di questo studio è quello di analizzare l¿effetto del trattamento con ciclosporina A sul turnover del collagene in fibroblasti di gengiva ottenuti da soggetti anziani sani, paragonati a soggetti giovani. I risultati ottenuti permetteranno di verificare se il processo dell¿invecchiamento può influenzare l¿entità della risposta dei fibroblasti di gengiva alla somministrazione di CsA.
A tale scopo verrà valutata l¿espressione dei principali geni e proteine coinvolti nei meccanismi di turnover del collagene e di rimodellamento della ME mediante tecniche di biologia molecolare (real-time RT-PCR) e di analisi delle proteine (western blot e SDS-zimografia). In particolare, verrà quantificata l¿espressione dei collageni interstiziali (collagene tipo I e III), delle principali metalloproteinasi della matrice (MMP-1 e 2), degli inibitori delle MMP (TIMP), della lisil idrossilasi (coinvolta nella maturazione del collagene), del TGF-beta1 (citochina pluripotente in grado di regolare il turnover del collagene), e della SPARC (proteina over espressa in condizioni di rimodellamento della matrice extracellulare). Verranno inoltre allestite curve di crescita per analizzare l¿effetto sulla proliferazione dei fibroblasti.
I risultati di questo studio potranno fornire informazioni utili al clinico nell¿impostare la terapia farmacologia nel soggetto anziano.