Le micotossine sono metaboliti secondari prodotti da miceti che si sviluppano su alimenti destinati al consumo umano e animale. Sono fattori antinutrizionali estrinseci, cioè xenobiotici contaminanti accidentali degli alimenti, dotati di tossicità e responsabili di patologie note come micotossicosi, di natura non contagiosa e non infettiva.
Poche informazioni e spesso contradditorie sono riportate relativamente agli effetti a livello riproduttivo di alcune micotossine come l' Aflatossina B1 (AFB1), l'Ocratossina A (OTA) e la Fumonisina B1 (FB1), prodotte da diversi miceti come Aspergillus, Penicillium e Fusarium. Poiché spesso queste micotossine si trovano contemporaneamente nell¿alimento, scopo della presente ricerca sarà quello di valutare gli effetti di AFB1, OTA, FB1 singolarmente e in associazione con metodi "in vitro".
Il progetto prevede l¿impiego di linee primarie di cellule della granulosa di suino e bovino, per valutare gli effetti sulla proliferazione cellulare, sulla steroidogenesi e una possibile attività "endocrine disruptor". Le cellule verranno coltivate sia in monostrato, sia su "inserts", o filtri semipermeabili, in modo tale da ottenere una polarizzazione, per l'individuazione di un comparto apicale e un comparto basolaterale, per l'applicazione delle micotossine.
La sperimentazione prevede l¿esposizione alle diverse micotossine sia i condizioni di tossicità acuta, che tossicità cronica.
Le cellule della granulosa di suino e bovino verranno prelevate da follicoli ovarici di piccole dimensioni provenienti da animali dopo la macellazione, e successivamente messe in coltura. Le cellule della granulosa verranno trattate con le singole micotossine, AFB1, OTA ed FB1, a concentrazioni prestabilite in presenza di concentrazioni variabili di IGF-1 (Insulin-Like Growth Factor-1, ricombinante umano) ed FSH. Inoltre verranno esposte a testosterone come precursore dell¿estradiolo, per valutare l¿attività dell¿aromatasi. Al termine dei trattamenti verranno valutati i seguenti aspetti:
A) Vitalità cellulare
B) Espressione del CYP19A1 a livello cellulare
C) Produzione di estradiolo e progesterone in Radio-Immuno ASSAY (RIA).
D) Eventuali metaboliti con metodiche cromatografiche