La riduzione del trasportatore del glutammato renale (EAAC1) e astrocitario (GLT1) è rispettivamente coinvolta in patologie quali aminoacidinuria e sclerosi laterale amiotrofica (SLA). In un modello cellulare di SLA familiare avevamo dimostrato che la riduzione dell¿attività di trasporto dipendeva da un aumento dell'endocitosi e degradazione di GLT1 (Vanoni et al., 2004). Nel caso del trasportatore renale del GABA (BGT1), avevamo inoltre identificato una causa dell¿aumento di endocitosi nella fosforilazione del trasportatore, in un residuo aminoacidico fondamentale per l¿interazione con la proteina scaffold LIN7 (Massari et al., 2005). In questo progetto verificheremo l¿ipotesi che eventi di fosforilazione siano responsabili anche della diminuzione di trasportatori del glutammato dalla superficie cellulare. A tale scopo abbiamo analizzato gli effetti di attivatori e inibitori di chinasi e fosfatasi sulla localizzazione e attività di trasporto dei trasportatori del glutammato (isoforme EAAC1 e GLT1). Risultati preliminari hanno permesso di identificare chinasi (PKC) e fosfatasi (calcineurina) coinvolte nell¿internalizzazione di EAAC1 e GLT1 in cellule renali di cane (MDCK). Particolarmente interessanti risultano i dati ottenuti con ciclosporina A, inibitore selettivo della calcineurina, il cui utilizzo come immunosoppressivo è considerato responsabile dell¿insorgenza di patologie renali in pazienti trapiantati. Infatti, mentre l¿endocitosi d¿entrambe le isoforme di trasportatore dipendono dall¿attività di PKC, solo l¿internalizzazione e l¿accumulo dell'isoforma renale in un compartimento di riciclo necessita anche dell¿attività di calcineurina. Allo scopo di identificare le regioni aminoacidiche responsabili della regolazione dei trasportatori, analizzeremo gli effetti di trattamenti con attivatori e inibitori di PKC e calcineurina sulla localizzazione, stato di fosforilazione e attività di trasporto di costrutti EAAC1 deleti e chimere EAAC1- GLT1.