Analisi delle interazioni fra fattori di trascrizione del circuito KNOX e ormoni vegetali nel controllo dell¿attività meristematica in orzo
Progetto Nelle piante, fattori trascrizionali (TF) della classe knox partecipano al mantenimento di uno stato indeterminato nelle cellule del meristema apicale e la loro repressione è un evento chiave per il differenziamento degli organi fogliari. I geni knox agiscono in parte attraverso il controllo dei pathway di alcuni ormoni coinvolti nello sviluppo del germoglio, ma scarse sono le informazioni su come i segnali ormonali influenzino l¿attività KNOX nel mantenimento del meristema.
Nel mutante K di orzo, l¿espressione ectopica del gene knox Bkn3 provoca la formazione di un meristema avventizio sulla lemma (Nature 374:727). Il fenotipo K è dovuto alla duplicazione di un enhancer presente in Bkn3. Lo stretto controllo dell¿attività di Bkn3 gioca quindi un ruolo critico per la delimitazione dell¿attività meristematica e il corretto differenziamento degli organi laterali. Quattro TF di orzo che legano l¿enhancer di Bkn3 sono stati identificati nel nostro gruppo (K Intron Binding Proteins, KIBP) e diverse evidenze suggeriscono che possano mediare il controllo delle gibberelline (GA) e dell¿etilene sull¿espressione di Bkn3. Gli ormoni potrebbero quindi rivestire un ruolo come regolatori a monte dei geni knox, oltre che come loro target a valle. I geni KIBP sono i primi candidati per svolgere un ruolo in questa regolazione.
Il presente progetto è volto alla caratterizzazione funzionale dei geni KIBP in orzo per ottenere maggiori informazioni sul loro ruolo nella regolazione di Bkn3 e nei processi di sviluppo con particolare riferimento alle interazioni con i circuiti delle GA e dell¿etilene. Obiettivi specifici:
1. ESAME DEGLI EFFETTI DI GA ED ETILENE SUL FENOTIPO K E SULL¿ESPRESSIONE DEI GENI KIBP E DI Bkn3. I livelli di espressione saranno confrontati in esperimenti di RealTime-PCR.
2. COSTRUZIONE DI PIANTE D¿ORZO CHE SOVRAESPRIMONO I GENI KIBP. In mancanza di mutanti kibp difettivi, gli effetti morfogenetici dei geni KIBP saranno esaminati in piante transgeniche di orzo.