STUDIO DEL RUOLO DEI GENI INDUCIBILI DA INTERFERON-BETA NELLO SVILUPPO DEI LEIOMIOMI UTERINI
Progetto I leiomiomi uterini rappresentano i tumori benigni più comuni del tratto riproduttivo femminile con un¿incidenza del 25% nella popolazione e rappresentano l¿indicazione clinica principale per l¿isterectomia. Gli eventi molecolari alla base del loro sviluppo risultano in gran parte sconosciuti. Un recente studio condotto dal nostro gruppo con lo scopo di valutare il profilo di espressione genica dei leiomiomi rispetto al miometrio sano mediante DNA microarrays ha evidenziato che alcune molecole regolate da interferon (IFN)-beta risultano essere negativamente modulate nel tumore. Gli IFN sono in grado di inibire la crescita tumorale ed esercitano effetti antitumorali, antivirali e immunomodulatori. Essi sono stati valutati sia in vitro che in modelli animali come agenti antitumorali dimostrandosi efficaci nell¿inibire la crescita in certi sottotipi neoplastici.
OBIETTIVI: In questo studio cercheremo di verificare se il pathway molecolare a valle della stimolazione di IFN-beta sia espresso in maniera abnorme nelle cellule derivanti da leiomioma, di rilevare un¿eventuale alterazione molecolare del recettore della citochina e valutare in termini potenzialmente terapeutici la capacità di IFN-beta di regolare la crescita e l¿apoptosi delle cellule muscolari lisce.
MATERIALI E METODI.
· Campioni di leiomioma e miometrio ottenuti da interventi di isterectomia previo consenso infermato. Le colture cellulari saranno ottenute mediante dispersione enzimatica e cresciute secondo procedure standard.
· Il confronto di espressione genica tra mioma e miometrio, la regolazione dell¿espressione da parte di IFN-beta e l¿espressione quantitativa del recettore verranno valutati mediante real-time PCR e/o western blot.
· Le cellule verranno trattate con e senza IFN-beta e gli effetti sulla proliferazione cellulare e sull¿apoptosi verranno stabiliti tramite Coulter Counter e Tunel test/analisi citofluorimetrica per l¿espressione di annexina.