Modulazione farmacologica della trasformazione delle cellule muscolari in cellule schiumose
Progetto La aterosclerosi e' caratterizzata da accumulo di colesterolo (C) libero ed estere nella parete arteriosa in particolare nei macrofagi che si trasformano in cellule schiumose (CS). Le CS arricchite di C hanno elevata attivita' infiammatoria e proaterogena e secernono metalloproteinasi (MMP), che degradano il cappuccio fibroso della placca aterosclerotica facilitandone la rottura. Quindi le CS sono un potenziale bersaglio farmacologico per controllare i processi aterogeni e le complicanze vascolari. Alcune delle CS derivano anche da cellule muscolari lisce (CML). Nostri dati preliminari dimostrano che incubando CML di topo con C si ha una transdifferenziazione delle stesse con accumulo di C estere ed espressione di caratteri macrofagici. La identificazione di molecole coinvolte in questo processo e' di particolare rilevanza. In precedenti FIRST abbiamo dimostrato che composti naturali (polifenoli e ajoene) e farmaci (statine) sono in grado di modulare diverse funzioni proaterogene delle CML e dei macrofagi quali produzione MMP e accumulo intracellulare di C.
Obiettivo: In questo progetto studieremo in modelli in vitro il coinvolgimento di ABCA1, una proteina coinvolta nella modulazione del contenuto intracellulare di C, nel processo di transdifferenziazione delle CML in macrofagi; i cambiamenti fenotipici simil-macrofagici cui possono andare incontro queste cellule; e la modulazione farmacologica di questi processi.
Descrizione: Lo studio verra' effettuato utilizzando CML vasali isolate da aorte di topi wild type, omozigoti od eterozigoti per la delezione di ABCA1, transdifferenziate a macrofagi dopo incubazione con C e incubati o meno con diversi composti (statine, polifenoli). Verranno misurati diversi parametri: contenuto di C totale, libero ed esterificato; attivita' di ACAT (enzima esterificante il C); espressione di markers di CML (alfa-actina, miosina) o di macrofagi (CD-36, molecole di adesione); secrezione di MMP; capacita' proliferativa delle CS