Le Fusariotossine come Deossinivalenolo (DON), Tossina (T-2) e Fumonisina B1 (FB1) sono micotossine contaminanti di mangimi e materie prime, con possibili effetti sinergici. A livello europeo sono state definite delle priorità relativamente al DON, tra cui l'importanza di allestire studi riguardanti effetti correlati a co-contaminazioni. Il progetto prevede attraverso l'impiego di metodiche "in vitro":
a) Studio di tossicità specie-specifica con cellule epiteliali intestinali neonatali di suino (specie target) IPEC-1,per valutare la citotossicità di DON, T-2, FB1, singolarmente e in associazione, attraverso la valutazione della vitalità e della proliferazione cellulare, e della resistenza elettrica transepiteliale (TEER), dopo esposizione acuta e cronica.
b) Studio con cellule intestinali Caco2 TC7-Clone, isolate da Caco-2 provenienti da tumore di colon ed esposte a metotrexato, coltivate primariamente in monostrato e successivamente su filtri semipermeabili, per polarizzare la cellula, consentendo la formazione di un comparto apicale (lume intestinale) e un comparto basolaterale (vascolare/linfatico).
Con questo modello verranno valutati:
1) Tossicità di DON, T-2, FB1 singolarmente e in associazione (Test del Rosso Neutro, LDH totale)
2) Metabolismo delle Fusariotossine,singolarmente e in associazione, per l'espressione a livello cellulare del CYP3A ed enzimi di II fase
3) Biodisponibilità e Trasporto (efflux-influx) di DON, T-2, FB1, singolarmente o in associazione ed eventuale coinvolgimento delle MDR, Multidrug Resistance, in particolare della P-glicoproteina, come pompa ATP mediata.
Verranno valutate, con metodiche cromatografiche, le concentrazioni di micotossine nel medium apicale e basolaterale e nelle cellule intestinali.