Studio dei meccanismi sottostanti l'effetto protettivo dei cannabinoidi nell'ischemia cerebrale
Progetto E' noto che il sistema endocannabinoide subisce delle modificazioni nei processi eccitotossici (van der Stelt et al. 2002; Veldhuis et al., 2003) e nell'ischemia cerebrale suggerendone un ruolo neuroprotettivo (Braida et al., 2000; Braida et al., 2003; Pegorini et al., 2005). Poiché la maggior parte dei cannabinoidi possiede proprietà psicoattive, la ricerca si sta indirizzando verso la sintesi di nuove molecole che possano agire sul metabolismo degli endocannabinoidi (anandamide, 2AG) e che non possiedano particolari effetti collaterali. Nel presente studio ci si propone di studiare il potenziale effetto neuroprotettivo di alcuni inibitori del trasportatore dell¿anandamide (AM 404), e della sua degradazione (bloccante dell'enzima amide idrolasi degli acidi grassi (FAAH), sull'ischemia cerebrale indotta nel gerbillo e consistente nella legatura delle carotidi (Braida et al., 2000, 2003; Pegorini et al., 2005. L'eventuale effetto protettivo verrà quantitativamente valutato da 1 a 7 giorni dopo trattamento attraverso la rilevazione di parametri elettroencefalografici, comportamentali (attività motoria spontanea, processi cognitivi e biochimico-cellulari (conta dei neuroni della zona CA1 ippocampale, presenza nell¿ippocampo di markers tipici del danno ischemico (Qi et al., (2004) quali alcune proteine associate al danno dei microtubuli (MAP2). Verrà infine analizzato il processo apoptotico mediante lo studio della Caspasi-3, enzima noto possedere un ruolo chiave nell¿apoptosi. Dal momento che l¿ischemia è accompagnata da processi infiammatori e liberazione di radicali liberi dell¿ossigeno, verrà anche indagata a livello cerebrale, l¿eventuale attività antinfiammatoria dell¿AM404 e dell'inibitore delle FAAH attraverso il dosaggio di alcune citochine e la misurazione del contenuto di malondialdeide, un indicatore della perossidazione dei lipidi e di nitriti/nitrati che sono il prodotto finale dell¿ossidazione del NO