Interazioni strutturali e funzionali tra i meccanismi di riparazione del DNA ed il checkpoint attivato da danni al DNA.
Progetto In risposta a danni al DNA tutte le cellule eucariotiche attivano un meccanismo di sorveglianza noto come checkpoint che porta, da una parte, al blocco o al rallentamento del ciclo cellulare, dall¿altra, all¿attivazione di complessi circuiti regolativi tra i meccanismi di replicazione, riparazione e ricombinazione del DNA tesi ad eliminare il danno mantenendo intatta la stabilità del genoma.
Nonostante molti geni che controllano la risposta cellulare al danno al DNA siano stati identificati, non si sa quasi nulla sulle proprietà biochimiche dei corrispondenti prodotti genici e sulle loro interazioni strutturali e funzionali.
Le attività di ricerca che ci proponiamo di affrontare sono : 1) screenings genetici tesi ad identificare geni coinvolti nella risposta cellulare a danni al DNA; 2) ricerca di partners molecolari di proteine di checkpoints mediante tecniche di ¿proteomics¿ (identificazione mediante spettrometria di massa di proteine che co-purificano con le proteine d¿interesse) ed identificazione di altri interattori con la tecnica del doppio ibrido (3); 3) studio delle interconnessioni tra diversi sistemi di riparazione del DNA ed attivazione del checkpoint; 4) ruolo della struttura della cromatina nel controllo dell¿attivazione del checkpoint; 5) caratterizzazione funzionale e biochimica di proteine di checkpoints e di proteine riparative in cellule di lievito ed in cellule umane.
La ricerca proposta è la continuazione di una ricerca già parzialmente finanziata nel 2005 che ha ottenuto risultati preliminari molto incoraggianti.
L¿obiettivo generale che si intende raggiungere con il presente progetto è quello di meglio comprendere le interazioni strutturali e funzionali tra meccanismi di riparazione ed il checkpoint attivato da danni al DNA.