Studio del recettore TIR8/SIGIRR in un modello di infezione da M. paratuberculosis in una linea di topi TIR8 knock-out
Progetto IL-1R e Toll-likeR appartengono a una superfamiglia di recettori filogeneticamente conservati, coinvolti nelle risposte immunitaria innata e infiammatoria. Tutti i membri di questa famiglia sono caratterizzati da una sequenza citoplasmatica conservata (dominio Toll/IL-1R, TIR) fondamentale nell¿attivazione della cascata del segnale, finemente regolata in modo da evitare un¿eccessiva reazione immunitaria o infiammatoria. Il recettore orfano TIR8/SIGIRR appartenente a questa famiglia svolge un importante ruolo di inibitore dell¿attivazione della cascata del segnale, comportandosi come un decoy receptor. TIR8/SIGIRR ha un singolare pattern di espressione; è altamente espresso nel rene e in tutto il tratto gastro-intestinale, moderatamente espresso in cellule dendritiche immature e non è espresso in macrofagi, fibroblasti e cellule endoteliali. Nel modello murino è stato dimostrato che i knock-out (KO) per TIR8/SIGIRR sono più sensibili, rispetto ai wild-type (WT), alla colite cronica indotta da sodio destran solfato. Il progetto consiste nella messa a punto di un modello murino d¿infezione da Mycobacterium paratuberculosis, patogeno responsabile di una colite cronica nel bovino. A tale scopo, topi TIR8 KO e WT verranno infettati via i.p. con una sospensione viva di M. paratuberculosis e sacrificati a diversi tempi d¿infezione per il prelievo di organi da sottoporre ad esame istologico (valutazione danno tissutale) e ad esame colturale (conta unità formanti colonia). Inoltre diversi tipi cellulari isolati dai KO e WT (macrofagi peritoneali, cellule dendritiche, cellule intestinali epiteliali, splenociti) saranno stimolati in vitro con antigeni purificati di M. paratuberculosis al fine di esaminare i livelli di espressione delle citochine dopo estrazione dell¿RNA dalle cellule, a diversi tempi di stimolazione. Questo modello servirà a chiarire il ruolo di TIR8 in importanti patologie infiammatorie intestinali e per la messa a punto di efficaci protocolli terapeutici.