Il gene NOTCH1 codifica per un recettore transmembrana responsabile delle interazioni cellulari che contribuiscono allo sviluppo di diversi tessuti. L¿attivazione di NOTCH1 causa un taglio proteolitico e la traslocazione del dominio intracellulare (NICD) responsabile della segnalazione nel nucleo, dove avviene l¿interazione con fattori di trascrizione della famiglia CSL. NOTCH1 è coinvolto nell¿insorgenza di leucemie acute a cellule T in seguito a traslocazione t(7;9)( q34;q34.3) che dà origine ad una forma costitutivamente attiva di NOTCH1; linee cellulari T-ALL sono inoltre caratterizzate da un¿elevata attivazione di tale pathway indipendentemente dalla traslocazione t(7;9). Studi condotti nel nostro laboratorio indicano che NOTCH1 ha un ruolo anche nel processo di chemiotassi di cellule T-ALL in risposta a CCL25 e alle eotassine.
Il progetto si prefissa di studiare il rapporto e l¿integrazione fra il pathway di NOTCH1 e la via di segnalazione delle integrine. Le cellule T esprimono 12 delle 24 integrine note ; tali molecole sono implicate nei processi di migrazione verso i linfonodi periferici e i siti di infiammazione e nella formazione della sinapsi immunologica fra le cellule T e le APC. L¿interazione fra NOTCH1 e le integrine b1 è stata rilevata in cellule neurali staminali.
Piano sperimentale: il progetto si articola nei seguenti punti i) studio del pattern di espressione delle integrine in linee cellulari di T-ALL (citofluorimetria e RT-PCR) con particolare attenzione per le integrine di classe b1 e a4 ii) variazione del pattern di espressione di integrine in linee T-ALL in seguito ad ablazione di NOTCH1 mediante RNA interference iii) studio dell¿ interazione diretta fra NICD e integrine in condizioni basali e in seguito ad attivazione causata da ioni Mn2+ iv) effetto dell¿attivazione delle integrine sull¿espressione di geni target di NOTCH1 v) Effetto delle integrine sulla fosforilazione e sulla localizzazione intracellulare di NICD.