Valutazione della produzione di interferone gamma in gatti con coronavirosi mediante tecnica elispot
Progetto Presupposti della ricerca: La percentuale di gatti positivi per coronavirus felino (FCoV) raggiunge il 95% a fronte di una mortalità da perritonite infettiva felina (FIP, la forma letale di infezione da FCoV) del 5%. Ciò dipende in parte da mutazioni dei FCoV e in parte dalla risposta dell¿ospite: viene solitamente considerata protettiva la risposta cellulo-mediata di tipo Th1, nella quale è coinvolto l¿interferone-gamma (IFN-g). La produzione di IFN-g nei leucociti circolanti è bassa nei gatti con FIP ed elevata nei gatti con FCoV asintomatici ma è elevata nei tessuti di gatti con FIP. Il nostro gruppo ha dimostrato che anche la concentrazione ematica di IFN-g è maggiore negli asintomatici che nei malati (Giordano A et al., III convegno nazionale AIPVet, in stampa). Non è però chiaro quale tipo cellulare sia responsabile della secrezione di IFN-g e sia quindi coinvolto nella resistenza o suscettibilità a FCoV. L¿acquisizione di tale informazione potrebbe quindi fornire uno strumento utile a selezionare gatti resistenti alla patologia. Descrizione della ricerca: La ricerca verrà eseguita su campioni di sangue di gatti FCoV-negativi, di gatti FCoV-positivi asintomatici e di gatti con FIP. Su ogni soggetto verrà eseguito uno screening sierologico e clinicopatologico per confermare/escludere la presenza di alterazioni, anche subcliniche, imputabili a coronavirosi o malattie intercorrenti. I leucociti ematici verranno isolati mediante gradienti di densità e utilizzando beads magnetiche immunomarcate. I monociti e le sottopopolazioni linfocitarie verranno coltivati/e separatamente utilizzando kit commerciali basati sulla tecnica ELISPOT, che consente di rilevare in tempo reale, con metodi immunologici, la quantità di IFN-g secreto dai diversi tipi cellulari. Obiettivo della ricerca. Identificare il tipo cellulare responsabile della secrezione di IFN-g nel sangue di gatti FCoV-.infetti asintomatici ed identificare eventuali alterazioni di produzione nei gatti con FIP.